Acetyl-DNMT1 (K1127/K1129/K1131/K1133) Rabbit Polyclonal Antibody (P26358) for IHC-P, IF/ICC, ELISA

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: DNA (cytosine-5)-methyltransferase 1 기능 및 위치

DNMT1은 DNA 복제 동안 CpG 메틸화 패턴을 유지하여 후성유전적 유전을 보장하는 중요한 DNA 메틸전이효소입니다. 이것은 반메틸화 DNA를 선호적으로 메틸화하며 S기에서 복제 초점과 연관되지만, 전반적인 메틸화 경관을 보존하기 위해 G2 및 M기 동안 복제와 독립적으로도 작용합니다. DNMT1 매개 침묵은 HDAC2와의 직접적인 상호작용 및 히스톤 변형과 유전자 발현을 조절하는 코리프레서 복합체 형성을 포함합니다. 관련 참고문헌: PMID:17200670, PMID:18754681, PMID:21745816, PMID:26070743, PMID:10888872, PMID:24623306

이 효소는 주로 핵에 위치하며, 유비퀴틴화 히스톤 H3을 인식하는 RFTS 도메인을 통해 복제 초점의 염색질로 모집됩니다. 또한 핵소체 주변 영역에 위치하여 이질염색질 유지의 특수 기능을 반영합니다. 관련 참고문헌: PMID:12145218, PMID:24492612, PMID:29053958

DNMT1은 광범위하게 발현되며, 특히 태아 조직, 심장, 신장, 태반 및 말초 혈액 단핵구에서 높은 수준으로, 비장, 폐, 뇌, 소장, 결장, 간 및 골격근에서는 낮은 발현을 보입니다. 관련 참고문헌: PMID:10325416

DNMT1의 번역 후 변형, 특히 아세틸화는 중요한 조절 역할을 합니다. 이 항체가 표적하는 라이신 클러스터(아이소폼 1의 K1127/K1129/K1131/K1133)는 히스톤 아세틸전이효소에 의해 변형될 수 있고 단백질 안정성, 위치 지정, 다른 후성유전학적 인자와의 상호작용에 영향을 미칠 수 있는 알려진 아세틸화 부위(표준 서열의 K1111/K1113/K1115/K1117/K1119/K1121)에 해당합니다. 관련 참고문헌: PMID:21947282, PMID:19608861

실험 지침 및 기술 팁

• 이 토끼 폴리클론항체는 인간 DNMT1의 K1127, K1129, K1131, K1133을 포함하는 합성 아세틸화 펩타이드에 대해 제작되었습니다. 단백질의 아세틸화 형태를 특이적으로 인식할 것으로 예상됩니다.
• IHC-P의 경우, 에피토프를 노출시키기 위해 표준 항원 검색 방법(예: 시트르산 완충액, pH 6.0에서 열 유도 에피토프 검색)이 필요할 수 있습니다. 최적의 항체 희석 및 배양 조건은 경험적으로 결정해야 합니다.
• IF/ICC 수행 시, 4% 파라포름알데히드로 고정한 후 0.1% Triton X-100으로 투과화하는 것이 일반적으로 사용되지만, 이러한 단계는 특정 세포 또는 조직 시스템에서 검증되어야 합니다.
• ELISA는 세포 용해물 또는 조직 추출물에서 아세틸화된 DNMT1 수준을 검출하고 정량하는 데 사용할 수 있습니다. 결합 특이성을 확인하기 위해 펩타이드 경쟁 분석을 사용하는 것을 고려하십시오.
• DNMT1은 널리 발현되므로, 염색 패턴을 검증하기 위해 적절한 양성 및 음성 대조군(예: 알려진 아세틸화 상태의 조직 또는 세포주)을 포함하십시오.
• 예측된 분자량은 183 kDa입니다; 이 항체를 검증되지 않은 적용 분야(예: 웨스턴 블롯)에 재사용하는 경우, 밴드 크기와 특이성을 그에 따라 검증하십시오.

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