Acetyl-Histone H3 (K14) Rabbit Polyclonal Antibody | Q16695 / P68431 | WB, IF/ICC, ELISA

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: Acetyl-Histone H3 (K14) 기능 및 국소화

히스톤 H3는 뉴클레오솜의 핵심 구성 요소로, DNA를 감싸고 크로마틴으로 응축시킵니다. 이는 전사 기계 장치의 DNA 접근성을 제한하여 전사, DNA 복구, 복제 및 염색체 안정성을 조절합니다. 히스톤의 번역 후 변형은 통칭 히스톤 코드라고 불리며, 크로마틴 구조와 기능을 조절합니다.

관련 참고문헌:

• 히스톤 H3의 리신 14 (K14ac) 아세틸화는 전사적으로 활성화된 크로마틴과 관련된 잘 특성화된 마커입니다. GCN5/PCAF와 같은 히스톤 아세틸전이효소에 의해沉积되고 히스톤 디아세틸전이효소에 의해 제거됩니다. K14ac는 리신의 양전하를 중화시켜 히스톤-DNA 상호작용을 줄임으로써 크로마틴 이완을 촉진할 가능성이 있습니다.

관련 참고문헌: PMID:16185088, PMID:16267050, PMID:16457588

• 히스톤 H3는 주로 핵과 염색체에 국재합니다. 정형 히스톤 H3.1(여러 유전자로 인코딩됨, SWISS P68431)은 복제 의존적이며 세포 주기 전반에 걸쳐 발현됩니다. 대조적으로, 정세포 특이적 H3.1t 변이체(SWISS Q16695)는 정세포에서 발현되며 정자 형성 동안 정형 H3.1을 대체합니다.

관련 참고문헌:

• 이 항체는 인간 히스톤 H3.1 (NP_003520.1)의 K14 주변 잔기에 해당하는 합성 아세틸화 펩타이드를 사용하여 제작되었습니다. H3.1 및 H3.1t 아이소폼 모두에서 리신 14의 아세틸화 형태를 인식하여 다양한 생물학적 맥락에서 K14ac 연구를 가능하게 합니다.

관련 참고문헌: PMID:19608861

실험 가이드 및 기술적 팁

• 웨스턴 블롯 (WB): 히스톤 H3 K14 아세틸화의 최적 검출을 위해, 아세틸화 수준을 높이기 위해 히스톤 디아세틸전이효소 억제제(예: Trichostatin A, Sodium butyrate)로 처리한 세포에서 산 추출을 통해 히스톤을 농축하는 것을 고려하십시오. 분해를 위해 15% SDS-PAGE 젤을 사용하십시오. 아세틸화 펩타이드를 통한 경쟁적 억제 또는 야생형 및 HDAC 억제제 처리 샘플의 신호 비교를 통해 항체 특이성을 검증하십시오.
• 면역형광법/ICC: 4% 파라포름알데히드로 세포를 고정하고 0.1% Triton X-100으로 투과화하십시오. 메탄올 고정도 사용할 수 있습니다. 핵 염색 패턴을 확인하기 위해 펩타이드 경쟁과 같은 적절한 대조군을确保하십시오.
• ELISA: 플레이트 기반 분석에서 아세틸화 히스톤 H3 펩타이드를 검출하는 데 이 항체를 사용하십시오. 정규화를 위해 pan-H3 항체와 함께 사용하십시오.
• 이 항체는 K14 주변의 높은 염기서열 보존으로 인해 광범위한 종과 반응할 것으로 예상되지만, 인간, 마우스 또는 랫트가 아닌 샘플에서는 검증이 권장됩니다.

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