아세틸-히스톤 H3-K18 토끼 단클론 항체 (Q16695/P68431) | WB, IHC, ChIP, ELISA 검증 완료

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: 히스톤 H3의 기능과 위치

• 히스톤 H3는 DNA를 감아 염색질로 압축하는 핵심 뉴클레오솜 단백질로, DNA 의존적 기전에 대한 접근성을 제한하고 전사 조절, DNA 복구, DNA 복제 및 염색체 안정성에 중추적인 역할을 합니다. 관련 참고문헌: UniProtKB Q16695, UniProtKB P68431

• 세포핵에 위치하며 염색체와 결합합니다. 관련 참고문헌: UniProtKB Q16695, UniProtKB P68431

• 정규형 H3.1은 H3C1, H3C2 등 여러 유전자에 의해 암호화되며 체세포에서 복제 의존적으로 발현됩니다. H3.1t 변이체(Q16695)는 고환 세포에서 특이적으로 발현됩니다. 관련 참고문헌: UniProtKB Q16695

• 히스톤 H3는 "히스톤 코드"를 구성하는 광범위한 번역 후 변형을 받습니다. K18의 아세틸화(정규 H3 서열에서 19번 위치)는 전사 활성화 및 DNA 복구와 연결된 핵심 표지이며, 이 변형은 HAT와 HDAC에 의해 동적으로 조절됩니다. 이 위치의 아세틸화는 여러 연구에서 확인되었습니다. 관련 참고문헌: PMID:19608861, PMID:16267050, PMID:16627869, PMID:17194708, PMID:35939806

실험 가이드 및 기술 팁

• 본 항체의 면역원은 인간 히스톤 H3의 K18 부위를 포함하는 합성 아세틸화 펩타이드입니다. 생산된 토끼 단클론 항체는 아세틸화된 H3K18을 특이적으로 인식하며, 비변형 K18이나 다른 아세틸화 부위와 교차 반응하지 않을 것으로 예상됩니다. 아세틸화 펩타이드와 비아세틸화 펩타이드를 모두 사용한 경쟁 분석 또는 HDAC 저해제 처리로 세포를 처리하여 특이성을 검증하십시오.
• 웨스턴 블롯팅(WB)의 경우 ~16 kDa에서 단일 밴드가 예상됩니다. 아세틸화 수준을 정규화하기 위해 총 히스톤 H3 또는 H3 C-말단 항체와 같은 적절한 로딩 대조군을 사용하십시오. 트리코스타틴 A(TSA) 또는 나트륨 부티레이트와 같은 탈아세틸화 효소 저해제로 세포를 처리하면 아세틸화 신호가 증강될 수 있습니다.
• 면역조직화학(IHC-P)과 면역형광(IF/ICC)의 경우 항원 회수 및 투과화 조건을 최적화하십시오. IHC-P의 경우 내인성 퍼옥시다제 소거를 권장합니다. 동형 대조군과 비교하여 염색을 검증하십시오.
• 크로마틴 면역침전(ChIP)의 경우 히스톤 변형에 맞춰 교차결합 조건을 최적화하십시오. 활발히 전사되는 유전자 대 침묵된 유전자좌와 같이 적절한 양성 및 음성 대조군 유전자좌를 사용하십시오. qPCR로 농축 효율을 검증할 수 있습니다.
• 인간, 마우스, 래트 등에 대한 광범위한 교차 반응성이 예측되므로 대규모 실험을 진행하기 전에 관심 종에서의 반응성을 확인하십시오. 서열 정렬 결과 K18 주변 영역은 척추동물 전반에 걸쳐 높은 보존성을 보입니다.
• ELISA와 닷 블롯(DB) 적용의 경우 본 항체는 아세틸화된 H3K18 펩타이드나 재조합 히스톤을 검출하는 데 사용할 수 있습니다. 신호 증폭을 위해 바이오틴 표지 2차 항체와 스트렙타비딘-HRP를 사용하는 것을 고려하십시오.

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