아세틸-히스톤 H3 (Lys4) 토끼 단일클론 항체 (WB, ChIP, IF용) | Q16695/P68431

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: 히스톤 H3의 기능과 위치

• 히스톤 H3는 뉴클레오좀의 핵심 구성 요소로, DNA를 감아서 염색질로 압축합니다. 이는 DNA를 주형으로 사용하는 세포 기구에 대한 DNA 접근성을 제한하여 전사 조절, DNA 복구, DNA 복제 및 염색체 안정성에서 중심적인 역할을 합니다. 관련 참고문헌: UniProtKB Q16695, UniProtKB P68431

• DNA 접근성은 총체적으로 "히스톤 코드"라고 불리는 히스톤의 복잡한 번역 후 변형(PTM) 배열과 뉴클레오좀 리모델링에 의해 조절됩니다. 이러한 PTM에는 아세틸화, 메틸화, 인산화, 시트룰린화, ADP-리보실화 및 다양한 아실화가 포함됩니다. 관련 참고문헌: PMID:19608861, PMID:16267050, PMID:17194708

• 히스톤 H3는 주로 세포핵에 위치하며 세포 주기 전반에 걸쳐 염색체와 결합되어 있습니다. 관련 참고문헌: UniProtKB Q16695, UniProtKB P68431

• 표준 히스톤 H3.1 (HIST1H3A 등 여러 유전자에 의해 암호화됨)은 널리 발현되는 반면, H3.1t 변이체 (H3-4, HIST3H3)는 고환 세포에서 특이적으로 발현되며 정자 형성 과정에서 염색질 조직에 특화된 역할을 하는 것으로 추정됩니다. 관련 참고문헌: UniProtKB Q16695

• 히스톤 H3의 라이신 4 아세틸화(H3K4ac)는 활성 프로모터 및 개방형 염색질과 관련된 잘 특성화된 변형입니다. 종종 다른 활성화 마커와 공존하며 브로모도메인 함유 단백질에 의해 인식되어 전사 활성화를 촉진합니다.

실험 가이드 및 기술 팁

• 면역원은 인간 히스톤 H3의 K4 주변 잔기에 해당하는 합성 아세틸화 펩타이드입니다. N-말단 꼬리가 종간에 높게 보존되어 있으므로 마우스와 래트 샘플과의 교차 반응이 예측되지만, 사용하시는 특정 실험 모델에서 성능을 검증하는 것을 권장합니다.

• ChIP 분석의 경우, 표적 유전자좌에서의 농축을 확인하기 위해 아세틸화 및 비아세틸화 경쟁 펩타이드를 사용하여 항체 특이성을 검증하는 것을 고려하시기 바랍니다.

• 웨스턴 블롯에서 히스톤 H3는 약 15 kDa에서 이동합니다. 저분자량 단백질에 맞춰 겔 비율과 전사 조건을 최적화하시고, 신호 증강을 위해 핵 단백질 또는 산 추출 단백질 용해물을 사용하는 것을 권장합니다.

• 면역형광법의 경우, 에피토프 접근성과 배경에 영향을 미칠 수 있으므로 다양한 고정 방법(예: 4% PFA 대 메탄올)과 투과화 프로토콜을 테스트해보시기 바랍니다.

• H3 N-말단에는 다양한 변형이 존재하므로, 적절한 대조군을 사용하고 가능한 경우 돌연변이 히스톤 또는 재조합 단백질을 사용하여 이웃 PTM이 검출에 영향을 미치지 않는지 확인하시기 바랍니다.

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