Acetyl-Histone H4-K16 (P62805) Rabbit Polyclonal Antibody for WB and ELISA – Epigenetics Research

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: 히스톤 H4 기능 및 위치화

• 뉴클레오솜 코어 구성 요소: 히스톤 H4는 DNA가 감겨 염색질을 형성하는 뉴클레오솜 옥타머를 구성하는 네 가지 코어 히스톤 중 하나입니다. 이 기본 구조는 DNA 접근성을 제한하여 전사, DNA 수리, 복제 및 염색체 안정성을 조절합니다. 관련 참고문헌: UniProt P62805
• 세포 내 위치화: 정상 상태 조건에서 히스톤 H4는 주로 핵 내에서 발견되며, 염색체와 밀접하게 결합되어 있습니다. K16에서의 아세틸화와 같은 변형은 그 역동적 위치화에 영향을 미칩니다. 예를 들어, 아세틸화된 H4는 정자형성 단계 11의 정자세포에서 핵으로 위치화되는 것이 관찰됩니다. 관련 참고문헌: UniProt P62805
• 번역 후 변형과 히스톤 코드: 히스톤 H4는 N-말단 꼬리에서 아세틸화, 메틸화, 인산화, 유비퀴틴화 및 다양한 아실화 표지(예: 크로토닐화, 부티릴화, 숙시닐화)를 포함한 다양한 번역 후 변형(PTM)을 받습니다. 이러한 변형들은 염색질 구조와 유전자 발현을 지배하는 "히스톤 코드"를 구성합니다. K16을 포함한 특정 라이신 잔기의 아세틸화는 전사적으로 활성인 유염색질의 특징입니다. 관련 참고문헌: UniProt P62805
• K16 아세틸화의 기능적 중요성: 라이신 16에서의 H4 아세틸화(H4K16ac)는 고차 염색질 접힘과 전사 조절에 특히 중요합니다. 이 변형은 라이신의 양전하를 중화시켜 뉴클레오솜 간 상호작용을 방해하고 열린 염색질 형태를 촉진합니다. 이는 용량 보상, DNA 손상 수리 및 세포 노화와 관련이 있습니다. 관련 참고문헌: PMID:2474456, PMID:7664735, PMID:19608861 (히스톤의 일반적 아세틸화)
• 진화적 보존성: 히스톤 H4의 아미노산 서열은 효모에서 인간에 이르기까지 진핵생물 전반에 걸쳐 현저히 보존되어 있으며, 이는 이 항체의 예측된 광범위한 교차 반응성의 기초가 됩니다. 관련 참고문헌: UniProt P62805

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원 설계 고려사항: 이 항체는 인간 히스톤 H4의 라이신 16 주변 잔기에 해당하는 합성 아세틸화 펩타이드에 대해 제작되었습니다. 이 설계는 K16의 아세틸화 상태에 대한 특이성을 보장합니다. 그러나 비변형 H4 또는 다른 아세틸화된 라이신과의 교차 반응성은 귀하의 실험 시스템에서 평가되어야 합니다.
• 웨스턴 블롯(WB) 지침: WB 수행 시, 예측된 교차 반응성이 넓기 때문에 인간, 마우스 또는 래트 세포의 전세포 히스톤 추출물 또는 산 추출 히스톤을 사용하는 것을 고려하십시오. 작은 분자량(~11 kDa)으로 인해 최적의 분리를 위해 15% SDS-PAGE 또는 그라디언트 겔을 사용하십시오. 비아세틸화 대조군과의 신호 비교 또는 디아세틸라아제 억제제(예: TSA, sodium butyrate)를 사용하여 표적 결합을 확인함으로써 특이성을 검증하십시오.
• ELISA 응용: 이 항체는 아세틸화된 H4 펩타이드 또는 정제된 히스톤의 ELISA 기반 검출에 적합할 수 있습니다. 최적의 코팅 항원 농도를 확인하고 배경을 줄이기 위해 비인산/비아세틸 차단 완충액으로 차단하는 것을 고려하십시오.
• 종 간 교차 반응성: 히스톤 H4 서열의 높은 진화적 보존성을 기반으로 광범위한 교차 반응성이 예측됩니다. 이 항체가 인간, 마우스 및 래트와 반응한다고 보고되었지만, 잠재적인 PTM 차이로 인해 다른 종에서의 검증이 권장됩니다.
• 일반 기술 노트: 모든 PTM 특이적 항체와 마찬가지로, 아세틸화 신호를 보존하기 위해 내인성 디아세틸라아제 활성을 최소화하는 시료 준비(예: 용해 완충액에 HDAC 억제제 포함)를 보장하십시오.

CamelBio: 원스톱 소싱 브릿지

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