Acetyl-Histone H4-K5 Rabbit Polyclonal Antibody (P62805) – WB, ELISA, ChIP Applications

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: 히스톤 H4 기능 및 국소화

• 히스톤 H4는 뉴클레오솜의 핵심 구성 요소로, DNA를 감싸고 크로마틴으로 압축합니다. 이는 DNA를 주형으로 필요로 하는 세포 기계가 DNA에 접근하는 것을 제한하며, 이로 인해 히스톤은 전사 조절, DNA 복구, DNA 복제 및 염색체 안정성의 중심에 위치하게 됩니다. 관련 참고문헌: 직접 인용된 것 없음; 일반적인 기능 주석.

• DNA 접근성은 뉴클레오솜 리모델링과 함께 "히스톤 코드(histone code)"로 알려진 복잡한 번역 후 변형(PTM) 세트를 통해 조절됩니다. 중요한 PTM 중 하나는 리신 5 (K5)의 아세틸화이며, 이는 표준 UniProt 서열의 6번 위치에 있는 N6-아세틸리신에 해당합니다. 관련 참고문헌: PMID:2474456, PMID:7664735, PMID:19608861.

• 세포 내 국소화는 주로 핵이며 염색체와 결합합니다. 정자 형성 과정에서 아세틸화된 히스톤 H4는 11단계 정자 세포(spermatids)의 핵에 특이적으로 국소화하는 것이 관찰되었습니다. 관련 참고문헌: (유사성에 의함) UniProtKB P62805.

• 히스톤 H4는 메틸화, 시트룰화화, 크로토닐화, 인산화 및 유비퀴틴화를 포함한 수많은 다른 변형을 겪으며, 이들은 집합적으로 유전자 발현 패턴과 크로마틴 역학을 조율합니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 사람 히스톤 H4의 K5 영역에 걸친 합성 아세틸화 펩타이드입니다. 이 설계는 단백질의 아세틸화 형태에 대한 높은 특이성을 부여하는 것을 목표로 합니다.
• 웨스턴 블롯(WB)의 경우, 검출을 향상시키기 위해 핵이 풍부한 추출물(nuclear-enriched extracts)이나 산 추출 히스톤(acid-extracted histones)을 사용하는 것이 좋습니다. 약 11 kDa 부근의 밴드가 예상됩니다.
• ELISA에서 이 항체는 아세틸화된 히스톤 펩타이드나 재조합 히스톤 H4 단백질을 포�하거나 검출하는 데 사용할 수 있습니다. 최적의 신호 대 잡음비를 위해 적정(titration)을 권장합니다.
• 크로마틴 면역 침전(ChIP)의 경우, 이 항체는 H4K5ac로 표시된 게놈 영역을 농축하는 데 고려할 수 있습니다. 관련 세포 유형에서의 검증과 적절한 대조군(예: 비면역 IgG, input chromatin)이 필수적입니다.
• 히스톤 H4 N-말단의 보존성이 높기 때문에 사람, 쥐, 랫트 및 잠재적으로 다른 종 사이에 광범위한 교차 반응성이 예측됩니다. 그러나 대상 종에서의 실험적 검증이 권장됩니다.

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