Acetyl-HMGB1 (Lys29) 토끼 다클로날 항체 (P09429) - WB, IF/ICC, ELISA용

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: 고이동성군 단백질 B1 (HMGB1) 기능 및 국재화

• HMGB1는 DNA 샤페론으로 기능하여 전사, 복제, DNA 복구 및 게놈 안정성을 조절하는 매우 풒부하고 보편적으로 발현되는 비히스톤 염색체 단백질입니다. 또한 손상 및 염증 동안 세포 외 손상 관련 분자 패턴 (DAMP)으로 작용합니다. 관련 참고문헌: PMID:33147444, PMID:27362237

• HMGB1의 세포 내 국재화는 역동적으로 조절됩니다. 기저 조건에서는 주로 핵에 존재하지만, 핵과 세포질 사이를 지속적으로 이동합니다. 특정 자극이나 스트레스를 받으면 핵 국재화 신호 (NLS1: aa 28-44, NLS2: aa 179-185) 내의 주요 리신 잔기의 아세틸화를 포함한 번역 후 변형을 겪어, 비전형적 리소좀 매개 경로를 통해 세포질 축적 및 능동적 분비를 촉진합니다. 관련 참고문헌: PMID:12231511, PMID:17114460

• Lys29 (K29)에서의 아세틸화는 HMGB1 운송을 조절하는 여러 중요한 변형 중 하나입니다. K29를 포함한 NLS1 영역의 과아세틸화는 핵 수입을 방해하고 HMGB1가 세포질로 이동하여 최종적으로 세포 외 공간으로 방출되도록 하여, 그곳에서 사이토카인 유사 활동을 수행할 수 있게 합니다. 관련 참고문헌: UniProt P09429

• 세포 외 환경에서 HMGB1의 산화-환원 상태는 그 기능을 결정합니다. 완전히 환원된 HMGB1는 케모카인으로 작용하고, 이황화물 HMGB1는 사이토카인으로 작용하며, 산화된 HMGB1는 면역학적 관용을 촉진합니다. 세포 외 HMGB1는 RAGE, TLR2 및 TLR4와 같은 수용체에 결합하여 선천성 면역 반응을 활성화하며, 이로 인해 패혈증, 자가면역 질환 및 암에서 중요한 매개체가 됩니다. 관련 참고문헌: PMID:23446148, PMID:23519706

• HMGB1는 미생물 병인에도 역할을 하여 SARS-CoV-2 및 기타 바이러스의 침입을 돕고 오토파지 및 인플라마솜 활성화를 조절합니다. 관련 참고문헌: PMID:35239449, PMID:22696656

실험 가이드 및 기술적 팁

• 아세틸화의 가역적 특성으로 인해, 샘플 준비 중 아세틸화된 HMGB1를 보존하기 위해 용해 버퍼에 디아세틸화 억제제(예: 트리코스타틴 A, 니코틴아마이드)를 포함하십시오.
• 웨스턴 블로팅의 경우 HMGB1의 예상 분자량은 약 25 kDa이지만, 번역 후 변형으로 인해 약간의 이동이 발생할 수 있습니다. 양성 대조군으로 초기 대수기 또는 자극된 세포를 사용하십시오.
• 면역형광/ICC의 경우, 휴식 세포의 핵 염색과 비교할 때 아세틸화 유도(예: LPS 처리) 시 아세틸-HMGB1-K29 신호가 주로 세포질 또는 세포 외에 나타날 수 있습니다.
• ELISA 애플리케이션의 경우, 생물학적 유체에서 아세틸화된 HMGB1를 특이적으로 정량하기 위해 팬-HMGB1 항체와 짝을 이루어 이 항체를 포획 또는 검测试약으로 사용하는 것이 좋습니다.
• 쥐 및 랫트 HMGB1와의 교차 반응성이 확인되었으나, 관련 샘플 시스템에서의 검증이 권장됩니다.

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