WB, IF/ICC, FC, ELISA용 Anti-ADAM10 폴리클로날 항체 - O14672

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: ADAM10 기능 및 국소화

• ADAM10은 쿠즈바니안(Kuzbanian) 또는 CDw156으로도 알려져 있으며, ADAM(디스인테그린 및 메탈로프로테아제) 패밀리의 일원으로 다양한 기질의 세포외 도메인 절단(ectodomain shedding)에 관여하는 트랜스멤브레인 메탈로프로테아제로 기능합니다.
• 막 결합 종양 괴사 인자-알파(TNF-alpha) 전구체를 절단하여 가용성 TNF를 방출하며, 이는 염증 신호 전달의 중요한 단계입니다. 관련 참고문헌: PMID:20592283
• ADAM10은 아밀로이드 전구체 단백질(APP)에 대한 알파-시크레타제(alpha-secretase)로 작용하여 아밀로이드-베타 생성을 줄이고 이를 알츠하이머병 병리학과 연결합니다. 관련 참고문헌: PMID:11786905, PMID:26686862, PMID:29224781
• 또한 CD44, 카드헤린(cadherins), 에프린(ephrins), 노치(Notch) 리간드와 같은 다른 접착 분자 및 수용체를 절단하여 세포 접착, 이동 및 발달 신호 경로를 조절합니다.
• 세포 내적으로 ADAM10은 세포막, 골지체(Golgi apparatus), 클라트린 코팅 소포(clathrin-coated vesicles), 세포 접합부(부착 접합부)뿐만 아니라 축색 및 수상돌기와 같은 신경 돌기에 국소화합니다.
• 이 단백질은 당화, 이황화 결합 형성 및 활성 프로테아제 생성을 위한 프로도메인(pro-domain) 절단을 포함한 복잡한 번역 후 가공 과정을 거칩니다.
• ADAM10은 뇌, 림프 조직(비장, 림프절, 흉선), 골수 및 연골에 높은 수준으로 광범위하게 발현되며, 이는 신경 생성 및 면역 기능에서의 역할과 일치합니다. 관련 참고문헌: PMID:23676497, PMID:11511685, PMID:9016778

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 인간 ADAM10의 아미노산 214~672에 걸친 재조합 단백질로 주요 세포외 도메인을 포함하므로, 이 항체는 전장(full-length) 및 절단된 형태를 모두 인식할 수 있습니다.
• 웨스턴 블롯에서 전장 단백질에 대해 84 kDa 근처의 주요 밴드를 예상하십시오. 절단 또는 활성화로 인해 추가 밴드가 나타날 수 있습니다. 로딩 컨트롤을 최적화하고 특정 샘플 용해물로 검증하십시오.
• 면역형광/ICC의 경우, 표면 염색과 세포 내 염색 패턴을 비교하기 위해 투과 처리(permeabilized) 및 비투과 처리(non-permeabilized) 조건을 모두 테스트하십시오.
• 유세포 분석에서는 항체를 주의 깊게 적정(titrate)하고, 특히 ADAM10 발현 수준이 다른 세포를 분석할 때 배경을 고려하기 위해 아이소타입 컨트롤을 사용하십시오.
• ELISA를 수행할 때는 정량을 보장하기 위해 다른 에피토프에 특이적인 포획 항체와 짝을 이루거나 재조합 ADAM10을 표준으로 사용하는 것을 고려하십시오.
• 이 항체는 쥐 ADAM10과 교차 반응하는 것으로 보고되었으므로, 쥐 유래 샘플에서의 반응성을 확인하십시오. 다른 종의 경우 서열 상동성을 확인하고 파일럿 테스트를 수행하십시오.

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