WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA용 항-AKT1 다클론 항체 - P31749

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: AKT1의 기능 및 위치

• AKT1은 세린/트레오닌 단백질 키나아제이며, 단백질 키나아제 B(PKB)라고도 알려져 있고 AKT 키나아제 계열(AKT1, AKT2, AKT3)에 속합니다. 대사, 증식, 세포 생존, 성장 및 혈관신생을 포함한 다양한 과정을 조절합니다. 관련 참고문헌: PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136
• AKT1은 PI3K의 하위 경로에서 인슐린, IGF-1 및 EGF와 같은 성장인자의 효과를 매개하며, GLUT4 전위를 통한 포도당 흡수와 GSK3 억제를 통한 글리코겐 합성을 조절합니다. 관련 참고문헌: PMID:11994271
• BAD 및 MAP3K5와 같은 세포사멸 촉진 인자를 인산화하고 억제하며, NF-κB 및 CREB1을 포함한 생존 경로를 활성화하여 세포 생존을 촉진합니다. 관련 참고문헌: PMID:11154276 PMID:9829964
• AKT1은 세포질, 핵, 세포막 및 미토콘드리아 막간 공간에 위치하며, 이는 여러 신호 전달 구획에 관여함을 반영합니다.
• AKT1은 인산화 및 아세틸화와 같은 주요 번역 후 변형을 겪으며, 원암유전자로 간주됩니다. 암에서 발현이 흔히 증가하며, 유방암 진행 중에는 Tyr-176 인산화 형태가 증가합니다.
• AKT1은 인간 세포에서 광범위하게 발현되며 세포 성장과 분화에 중요한 역할을 합니다. 전립선 및 유방 악성 종양에서는 조직 특이적인 발현 증가가 관찰됩니다.

실험 지침 및 기술적 팁

• 면역원은 인간 AKT1의 C-말단 영역(aa 350–480) 내 펩타이드에 해당하며, 이는 아이소폼 특이성을 부여할 수 있습니다. 그러나 AKT2 또는 AKT3와의 교차 반응성이 우려되는 경우 재조합 단백질 또는 siRNA를 사용하여 검증하십시오.
• 웨스턴 블롯에서는 변성 및 환원 조건에서 일반적으로 약 56 kDa 위치의 밴드가 나타납니다. 적절한 양성 대조군(예: HeLa, MCF-7 용해물)을 사용하고, 관찰되는 이동도가 인산화 상태를 반영할 수 있음을 고려하십시오.
• IF/ICC 및 IHC-P 프로토콜에서는 각각 투과화 및 항원 회수가 필요할 수 있습니다. 시료 유형에 맞게 고정 방법(예: 4% PFA 대 메탄올)을 최적화하고, 배경을 최소화하기 위해 차단 단계를 포함하십시오.
• ELISA 적용은 간접 방식 또는 샌드위치 방식으로 설정할 수 있으며, 적절한 포획 항체와 조합하면 감도가 향상될 수 있습니다. 항체를 적정하고 일관된 코팅 완충액을 사용하십시오.
• 마우스 및 랫드 AKT1과의 교차 반응성이 보고되어 있지만, 비인간 시료를 사용하는 경우 면역원 영역에서 종 특이적 서열 상동성을 확인하십시오.

CamelBio: 원스톱 소싱 파트너

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