WB, ELISA용 항ALG13 토끼 다클론 항체 - Q9NP73

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: ALG13 기능과 위치

• ALG13는 UDP-N-아세틸글루코사민 전이효소 복합체의 촉매 소단위로, 아스파라긴 연결 당화 13 상동체 또는 당전이효소 28 도메인 함유 단백질 1이라고도 알려져 있습니다. 소포체 세포질 면에서 돌리콜 연결 올리고당 생합성의 두 번째 단계를 매개합니다.
• 필수 결합 파트너인 ALG14와 함께 ALG13는 이량체 복합체를 형성하여 UDP-GlcNAc로부터 GlcNAc-피로인산돌리콜로 β1,4 연결 N-아세틸글루코사민(GlcNAc)을 전달하여 N,N′-디아세틸키토바이오실 디인산돌리콜을 생성합니다. 이 중간체는 이후 ALG1 및 다른 당전이효소에 의해 연장됩니다.
• ALG13/ALG14 복합체는 소포체 막에 고정되어 있으며, 여기서 돌리콜 연결 올리고당 전구체가 조립된 후 ER 내강으로 이동하여 추가 처리가 이루어지고 최종적으로 새로 합성되는 폴리펩티드로 전달됩니다.
• 서열 모티프(티올 프로테아제, 가수분해효소 도메인)를 기반으로 잠재적인 다기능 효소로 주석되어 있지만, GlcNAc 전달 역할 외에 ALG13의 당전이효소 또는 탈유비퀴틴화 효소 활성은 아직 검출되지 않았습니다. 만약 추가적인 생화학적 활성이 존재한다 하더라도 아직 잘 특성화되지 않았습니다.
• ALG13 유전자의 돌연변이는 선천성 당화 장애 Is형(CDG1S) 및 영아 조기 간질 뇌병증(DEE36, EIEE36)과 관련이 있으며, 이는 정상 신경 발달과 전체 단백질 N-당화에서 이 효소가 매우 중요한 역할을 한다는 것을 보여줍니다.
• 대체 스플라이싱을 통해 여러 ALG13 아이소폼이 생성되며, 단백질은 유비퀴틴화(Ubl 접합 경로)를 통해 조절되는데, 이는 단백질 안정성이나 기능을 조절할 수 있습니다.

실험 가이드 및 기술 팁

• 사용된 면역원은 인간 ALG13(아이소폼 NP_001311219.1)의 100–167 잔기를 포함하는 합성 펩타이드입니다. 이 에피토프는 마우스 ALG13에서도 보존되어 있어 마우스 시료와의 교차 반응성이 확인됩니다.
• 웨스턴 블로팅의 경우 ALG13 발현이 알려진 인간 또는 마우스 세포주를 양성 대조군으로 포함하여 항체 특이성을 검증하고, ~126 kDa 밴드를 확인하기 위해 siRNA 넉다운 또는 과발현 실험을 고려해 보세요.
• 기능성 ALG13/ALG14 복합체를 연구하려면 두 소단위를 모두 검출하는 공동면역침전 또는 근접 연결 분석을 사용하는 것을 고려해 보세요.
• ELISA 적용에서 표준 곡선을 작성하기 위해 재조합 ALG13 단백질 또는 면역화 펩타이드를 코팅 항원으로 사용하고, 최적의 신호 대 잡음비를 얻기 위해 항체를 적절하게 적정해 사용하세요.
• ALG13는 막 연관 단백질이므로, ER 막 분획을 효율적으로 용해화하기 위해 용해 완충액에 충분한 계면활성제(예: 1% Triton X‑100 또는 NP‑40)를 포함하는지 확인하세요.

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