Anti-Asymmetric DiMethyl-Histone H3-R17 Rabbit Polyclonal Antibody (Q16695/P68431) for WB, IF/ICC, ELISA

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: 비대칭 디메틸-히스톤 H3-R17의 기능 및 위치

• 히스톤 H3는 뉴클레오솜의 핵심 구성 요소로, DNA를 염색질로 감싸며 전사 조절, DNA 수리, DNA 복제 및 염색체 안정성에 중심적인 역할을 합니다. 히스톤의 번역 후 변형(PTM)은 히스톤 코드로 총칭되며, 염색질 접근성과 기능을 지배합니다.
• 아르지닌 17에서 히스톤 H3의 비대칭 디메틸화(H3R17me2a; UniProt 정준 서열의 위치 18에 해당)는 단백질 아르지닌 메틸전달효소 CARM1(코액티베이터 관련 아르지닌 메틸전달효소 1)에 의해 촉매됩니다. 이 변형은 전사 활성화 및 코액티베이터 복합체의 모집과 관련이 있습니다.
• 정준 히스톤 H3.1(H3C1, H3C2 등과 같은 여러 유전자에 의해 암호화됨; UniProt P68431)과 고환 특이 변이체 H3.1t(H3-4; UniProt Q16695) 모두 이 변형을 지닙니다. H3.1t는 고환 세포에서 발현되며, H3.1은 체세포에서 광범위하게 발현됩니다.
• 히스톤 H3는 핵에 위치하며 주로 염색체를 따라 뉴클레오솜에서 발견됩니다. R17이 위치한 N-말단 꼬리는 뉴클레오솜 코어에서 돌출되어 있으며, 유전자 발현을 조절하는 수많은 PTM의 핫스팟입니다.
• 합성 펩타이드 면역원은 인간 히스톤 H3의 처음 100개 아미노산에 해당하며, 진핵생물 사이에서 매우 보존된 영역입니다. 이로 인해 이 항체의 넓은 교차 반응성이 예측됩니다. 관련 참고문헌:
• PMID:15345777
• PMID:15471871
• PMID:16497732
• UniProt Q16695
• UniProt P68431

실험 지침 및 기술 팁

• 웨스턴 블롯팅(WB)의 경우, 관련 세포주로부터 산 추출 히스톤 또는 전세포 용해물을 사용하는 것이 권장됩니다. 히스톤 H3의 예상 분자량은 약 15 kDa입니다. 비대칭 디메틸-R17 변형에 대한 검출 특이성을 확인하기 위해 펩타이드 경쟁 분석 또는 CARM1 녹아웃 샘플 사용을 고려하십시오.
• 면역형광/면역세포화학(IF/ICC)에서는 고정 및 투과화 조건이 에피토프 접근성에 큰 영향을 미칩니다. 메탄올 고정은 종종 핵 신호를 향상시킵니다; 배경을 최소화하기 위해 항체 희석 및 차단 단계를 최적화하십시오.
• ELISA의 경우, 이 항체는 합성 펩타이드와 함께 사용되어 비대칭 디메틸-R17을 대칭 디메틸 또는 비변형 H3 펩타이드와 구별하는 데 사용될 수 있습니다. 특이성을 보장하기 위해 적절한 대조군을 포함하십시오.
• 예측된 넓은 교차 반응성으로 인해, 중요한 실험에 적용하기 전에 특정 종 및 조직 모델에서 항체를 검증하십시오.
• 이 항체는 메틸화 항체 카테고리의 구성원이며 후성유전학 연구에 적합합니다. 여기서는 크로마틴 면역침전(ChIP) 또는 멀티플렉스 분석에 대해 검증되지 않았지만, 적절한 최적화와 함께 다른 히스톤 변형 특이적 시약과 통합하여 그러한 응용 분야에 사용할 수 있습니다.

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