WB, IF, ELISA용 Anti-ATG4B 토끼 단일클론 항체 - Q9Y4P1

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: ATG4B 기능 및 국소화

• ATG4B (APG4B, AUTL1, autophagin-1로도 알려짐)는 거대오토파지, 비정형 오토파지 및 미토파지에 필수적인 ATG8 패밀리 단백질의 단백질 분해적 처리 및 탈지질화를 매개하여 오토파지를 조절하는 핵심 시스테인 프로테아제입니다. 관련 문헌: PMID:15169837, PMID:15187094, PMID:17347651, PMID:33773106, PMID:33909989

• 이 효소는 ATG8 동족체(MAP1LC3A/B/C, GABARAP, GABARAPL1/2)의 C-말단 아미노산을 절단하여 보존된 글리신을 노출시키며, 이는 인지질에틸anolamine(PE)과의 결합 및 오토파고솜 막으로의 삽입을 위한 전제 조건입니다. 관련 문헌: PMID:15169837, PMID:15187094, PMID:17347651

• ATG4B는 또한 탈지질화 효소로 작용하여 ATG8 단백질에서 PE를 분리하여 재순환을 촉진합니다. 또한 비정형 오토파지 동안 단일 막 구조에서 ATG8 단백질을 처리합니다. 관련 문헌: PMID:15187094, PMID:19322194, PMID:29458288, PMID:33909989

• 미토파지에서 ATG4B는 미토콘드리아로의 ATG9A 운송을 조절하고 지질 전이를 위한 소포체-포식세포 접촉을 가능하게 하여 프로테아제 활성과 독립적으로 포식세포의 성장을 촉진합니다. 관련 문헌: PMID:33773106

• 4가지 포유류 ATG4 패랼로그(ATG4A–D) 중 ATG4B는 ATG8 활성화를 위한 주요 프로테아제이지만, ATG4A 및 ATG4D와 비교할 때 상대적으로 약한 탈지질화 활성을 나타냅니다. 관련 문헌: PMID:29458288, PMID:30661429

• 세포 내적으로 ATG4B는 세포질, 세포질 용액, 오토파고솜, 소포체 및 미토콘드리아에 위치하며, 이는 오토파지 및 관련 경로에서의 다면적인 역할과 일치합니다.

• 효소 활성 및 세포 내 분포를 조절할 수 있는 아세틸화, 인산화, S-니트로실화 및 글리케이션을 포함한 번역 후 수정이 보고되었습니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 인간 ATG4B의 잔기 200-300 내부의 펩타이드에 해당하며, 이는 촉매 도메인에 위치한 영역입니다. 항체 반응성은 번역 후 수정 또는 구조적 상태에 의해 영향을 받을 수 있습니다.
• 웨스턴 블로팅의 경우 ATG4B는 약 44 kDa에서 이동합니다. 내인성 수준은 다를 수 있으므로 검출을 향상시키기 위해 오토파지 유도제(예: 굶기, 라파마이신)를 사용하는 것이 좋습니다.
• 면역형광 애플리케이션에서 ATG4B는 미토파지 조건 하에서 오토파고솜 마커(예: LC3) 및 미토콘드리아 마커와 공동 국재화할 수 있는 점상 세포질 분포를 나타냅니다. 녹아웃 세포주에서 특이성을 검증하십시오.
• 이 항체는 마우스 및 쥐 ATG4B와 교차 반응하는 것으로 보고되었습니다. 그러나 다른 종에 대해서는 면역원 영역의 서열 정렬을 확인해야 합니다.
• ELISA 애플리케이션은 정량화에 사용할 수 있습니다. 일치하는 항체 쌍을 사용한 샌드위치 ELISA 형식을 고려하십시오.

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