WB, IF/ICC, ELISA용 항-ATG4D 토끼 다클론 항체 - Q86TL0

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: ATG4D 기능과 국소화

• ATG4D는 ATG8 패밀리 단백질의 단백분해 활성화와 탈지질화를 모두 매개하여 자가포식에서 핵심적인 역할을 하는 시스테인 단백분해효소입니다. 포스파티딜에탄올아민(PE)과의 접합 및 막 삽입에 필수적인 글리신 잔기를 노출시키기 위해 MAP1LC3와 GABARAPL2의 C-말단 아미노산을 절단합니다. 관련 참고문헌: PMID:21177865
• 단백분해 활성화 외에도, ATG4D는 대자살포시 과정에서 PE가 접합된 ATG8 단백질의 탈지질화와 비정규 자가포식에서 포스파티딜세린(PS)이 접합된 ATG8 단백질의 탈지질화를 촉매하며, ATG4 패밀리 구성원 중 주요 탈지질화 효소로 작용합니다. 관련 참고문헌: PMID:29458288, PMID:33909989
• ATG4D는 미토파지 과정에서 자가분해효소 활성과 무관하게 미토콘드리아로의 ATG9A 수송을 조절하고 지질 전달 과정에서 식별포-소포체 접촉을 촉진하여 식별포 성장에 관여합니다. 관련 참고문헌: PMID:33773106
• 이 단백질은 미토콘드리아 기능장애를 세포자살과 연결하는 자가포식 조절자로 작용하며, 세포 스트레스와 분화 과정에서 미토콘드리아로 수입되어 미토콘드리아 생리, ROS 수준, 미토파지 및 세포 생존율에 영향을 미칩니다.
• 아세포 내에서 ATG4D는 세포질과 미토콘드리아 기질에 국소화되며, 이는 자가포식과 미토콘드리아 조절에서의 이중 역할과 일치합니다.
• 넓게 발현되며 고환에서 뚜렷한 발현을 보이고 대안 스플라이싱을 거칩니다. 번역 후 변형으로는 인산화가 포함됩니다.

실험 가이드 및 기술 팁

• 면역원은 인간 ATG4D의 N-말단 영역(아미노산 1-230)에 해당합니다. 샘플을 다룰 때 이 영역은 아이소폼이나 종 간에 보존될 수 있으므로, 그에 따라 밴드 패턴을 검증하시기 바랍니다.
• 웨스턴 블롯팅(WB)의 경우 예상 분자량은 약 53 kDa이지만, 내인성 ATG4D는 단백분해 가공이나 변형을 거칠 수 있습니다. 인간 또는 마우스 세포 유래 적절한 양성 대조군과 용해물을 사용하여 밴드 크기를 검증하시기 바랍니다.
• 면역형광/면역세포화학(IF/ICC)에서는 세포질 및 미토콘드리아 염색 패턴을 평가하시기 바랍니다. 미토콘드리아에 국소화된 ATG4D를 검출하려면 고정 및 투과화 조건의 최적화가 필요할 수 있습니다.
• ELISA 적용의 경우, 본 항체는 재조합 또는 내인성 ATG4D 검출에 사용할 수 있습니다. 알려진 항원 농도로 표준 곡선을 구축하고 다중 검정을 수행하는 경우 관련 ATG4 패밀리 구성원과의 교차 반응성을 고려하시기 바랍니다.

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