WB, IHC-P, ELISA용 항베타2 미세구글불린 다클론 항체 - P61769

주요 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: 베타2 미세구글불린의 기능과 위치

• 베타2-미세구글불린(B2M)은 클래스 I 주요 조직적합성 복합체(MHC I)의 경쇄로, 펩티드 항원을 CD8+ T 세포에 제시하는 데 필수적이며 따라서 적응 면역에서 중요한 역할을 합니다.
• 세포 표면에서 MHC I 중쇄와 비공유 결합으로 결합되어 있는 분비 단백질이며, B2M의 접힘과 조립은 안정적인 MHC I 발현에 핵심적입니다.
• 외인성 결핵균 EsxA 단백질은 B2M에 결합하여 세포 표면으로의 내보내기를 감소시켜 클래스 I 항원 제시를 손상시킬 수 있습니다(PubMed:25356553).
  관련 참고문헌: PMID:25356553
• 구조적으로 B2M은 면역글로불린 유사 도메인을 포함하며 분자내 이황화 결합(Cys25-Cys80)에 의해 안정화됩니다. 당화 및 N-말단 피로글루탐산 형성을 포함한 번역 후 변형을 거치는 당단백질입니다.
• B2M의 돌연변이는 가족성 고이화 저단백혈증 및 아밀로이드증과 연관되어 있으며, 조직에 섬유질 침착물을 형성할 수 있는데, 특히 투석 관련 아밀로이드증에서 두드러집니다.
• 작은 크기(이론적 분자량 ~13.7 kDa)에도 불구하고, 베타2-미세구글불린은 환원 조건의 SDS-PAGE에서 약 14 kDa 위치에서 이동합니다.

실험 가이드 및 기술 팁

• 면역원은 신호 펩티드를 제외한 성숙 분비형(아미노산 21-119번)에 해당합니다. 이 항체는 환원 및 비환원 B2M 모두를 인식할 수 있지만, 일관된 결과를 위해 이황화 결합을 파괴하기 위해 변성 및 환원 조건(예: DTT와 함께 95°C에서 가열) 하에서 검증하십시오.
• 웨스턴 블롯의 경우 총 세포 용해물 10–30 µg 또는 농축된 혈청을 로드하고, 림프구가 풍부한 조직(비장, 림프절)이나 MHC I을 발현하는 세포주를 양성 대조군으로 사용하십시오.
• 포르말린 고정 파라핀 포매(IHC-P) 절편의 면역조직화학에서는 구연산 완충액(pH 6.0) 또는 EDTA 완충액(pH 9.0)으로 항원 회수를 수행하고, 염색 강도를 최적화하기 위해 적정 실험을 고려하십시오.
• 이 항체는 마우스와 래트 B2M과 교차 반응하므로 설치류 모델에 적합합니다. 종 반응성을 확인하기 위해 서열 상동성을 검증하고 관련 조직 용해물을 테스트하십시오.
• ELISA에서는 포획 항체 또는 검출 항체로 사용할 수 있습니다. 다른 에피토프를 인식하는 다른 클론과 짝을 이루면 샌드위치 분석에서 감도를 향상시킬 수 있습니다. 코팅 완충액과 희석 배율을 최적화하십시오.
• B2M이 분비되기 때문에 세포가 없는 시료도 분석할 수 있습니다. 저농도 표적의 경우 면역침전 또는 농축을 통한 농축이 필요할 수 있습니다.

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