Anti-Caspase-9 다클로널 항체 [WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA용] - P55211

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: Caspase-9 기능 및 국재화

• Caspase-9는 카스파제(caspase) 패밀리의 시스테인 프로테아제로, 내재성 세포자멸사 경로(intrinsic apoptotic pathway)에서 개시 카스파제(initiator caspase)로 기능합니다.
• Apaf-1에 결합하면 Caspase-9가 활성화되고, 이후 Caspase-3 및 Caspase-7과 같은 이펙터 카스파제(effector caspases)를 절단 및 활성화하여 세포자멸사를 수행합니다.
• Caspase-9는 ABL1/c-Abl 의존적 방식으로 DNA 손상 유발 세포자멸사를 촉진하고 폴리(ADP-리보스) 폴리머라제(PARP)를 단백질 분해적으로 절단합니다.
• Caspase-9는 DIABLO/SMAC에 의해 BIRC6-caspase 결합이 억제된 후 BIRC6을 절단합니다. 관련 참고문헌: PMID:36758105, PMID:36758106
• 대체 스플라이싱 isoform인 Caspase-9S는 촉매 활성이 없으며 전장 효소(full-length enzyme)의 우성 음성 억제제(dominant-negative inhibitor)로 작용합니다.
• 심장(특히 심근 세포)에서 가장 높게 발현하고, 간, 골격근 및 췌장에서 중간 정도로 발현하며, 다른 조직에서는 낮게 발현합니다.
• 번역 후 수정(PTM)에는 인산화(phosphorylation)와 유비퀴틴 접합(ubiquitin conjugation)이 포함되며 활성을 조절합니다. 단백질 분해 처리(proteolytic processing)가 필요한 지모겐(zymogen)으로 합성됩니다.
• 키워드: 세포자멸사(Apoptosis), 가수분해효소(Hydrolase), 프로테아제(Protease), 티올 프로테아제(Thiol protease), 인산화 단백질(Phosphoprotein), Ubl 접합(Ubl conjugation), 지모겐(Zymogen), 대체 스플라이싱(Alternative splicing), 3D 구조(3D-structure).

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 인간 Caspase-9의 아미노산 139-416에 해당하며 여기에는 소단위체(large subunit)가 포함됩니다. 이 항체는 전장 프로폼(proform, ~46 kDa)과 처리된 형태(processed forms)를 모두 검출할 수 있습니다. 적절한 분자량 마커를 포함하십시오.
• 웨스턴 블랏의 경우, 이 조직에서 비교적 높은 발현을 보이므로 양성 대조군(positive control)으로 심장 또는 간 조직 용해물(lysate)을 사용하는 것이 좋습니다.
• 면역조직화학(IHC)의 경우, 심장 또는 간 조직 섹션에서 염색을 검증하고 포르말린 고정 파라핀 포매(FFPE) 조직에 대한 항원 회수 조건(antigen retrieval conditions)을 최적화하십시오.
• 면역형광의 경우, Caspase-9는 주로 세포질에 국재합니다. 세포자멸사 활성화를 평가하기 위해 미토콘드리아 마커와 이중 염색(co-staining)을 고려하십시오.

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