WB, FC, ELISA용 항-CD16b 토끼 단일클론 항체 - O75015

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: CD16b의 기능 및 위치

• CD16b(FcγRIIIB)는 면역글로불린 감마의 Fc 영역에 대한 저친화성 수용체로, FCGR3B 유전자에 의해 암호화됩니다. 막관통 도메인이 없는 글리코실포스파티딜이노시톨(GPI)-고정 당단백질이며, 이러한 점에서 FcγRIIIA와 구별됩니다.
• 이 수용체는 복합체를 형성하거나 응집된 IgG 및 단량체 IgG에 결합하지만, FcγRIIIA와 달리 항체 의존성 세포매개 세포독성(ADCC)이나 식세포작용을 매개하지 않습니다. 따라서 호중구를 활성화하지 않고 말초 혈액 순환에서 면역 복합체를 포획하는 미끼 수용체로 기능할 가능성이 높습니다.
• CD16b는 다형핵 백혈구(호중구) 및 자극된 호산구에서 특이적으로 발현되며, 과립구의 선천면역 감시에서의 역할을 뒷받침합니다.
• 세포 내 위치 측면에서 CD16b는 세포막에 존재하며, GPI 앵커의 절단에 의해 분비형으로 방출될 수 있습니다.
• 이 단백질은 2개의 면역글로불린 유사 도메인을 포함하고 광범위하게 당화되어 있습니다. 예측 분자량은 약 26 kDa(핵심 단백질 26,243 Da)이며, 당화로 인해 확산된 밴드로 관찰되는 경우가 많습니다.
• 주요 구조적 특징으로는 N-말단 신호 펩타이드(aa 1-18), 세포외 IgG 결합 도메인(aa 20-208, 면역원으로 사용됨), C-말단 GPI 앵커 부착 부위가 있습니다. 여러 별칭(CD16, FCG3, FCGR3, FCR-10, FCRIII)은 과거의 명명법을 반영합니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 이 면역원은 인간 CD16b의 전체 세포외 IgG 결합 도메인(aa 20-208)을 포함하므로, 다양한 적용 분야에서 천연 단백질과 변성 단백질을 모두 검출하는 데 적합합니다.
• 웨스턴 블롯(WB)에서는 환원 조건에서 약 26 kDa의 밴드가 예상됩니다. 당화로 인해 번짐 또는 확산된 밴드가 나타날 수 있으므로, 적절한 양성 대조군(예: 호중구 용해물)으로 검증하고 선명한 밴드가 필요한 경우 탈당화를 고려하십시오.
• 유세포분석(FC)에서는 살아 있고 고정하지 않은 호중구 표면의 CD16b를 검출하기 위해 호환 가능한 형광물질 접합 2차 항체를 사용하십시오. GPI 고정 단백질의 무결성을 변화시킬 수 있는 고정 방법은 피하십시오.
• ELISA에서는 이 항체를 포획 또는 검출 시약으로 사용할 수 있습니다. 샌드위치 형식에서는 비경쟁적 항-CD16b 클론과의 조합을 권장하며, 재조합 또는 정제된 CD16b 단백질을 사용하여 분석 조건을 최적화해야 합니다.
• 교차 반응성은 인간에 한정되며, 마우스 또는 랫드 CD16b와의 반응성은 예상되지 않습니다. 따라서 적절한 모델 시스템을 선택하거나 인간 샘플을 사용하여 검증하십시오.

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