Anti-CD45 Rabbit Monoclonal Antibody for FC, ELISA - P08575

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: CD45 기능 및 국재화

• CD45는 백혈구 공통 항원(L-CA) 또는 T200라고도 하며, 면역 세포 신호 전달에서 중요한 역할을 하는 수용체형 티로신 단백질 인산화 효소(PTPRC)입니다.
• DPP4와 결합할 때 T 세포 공동 활성화의 양성 조절 인자로 작용합니다. 첫 번째 PTPase 도메인은 효소 활성을 가지며, 두 번째 도메인은 첫 번째 도메인의 기질 특이성에 영향을 미치는 것으로 보입니다. T 세포 활성화 시 SKAP1 및 FYN을 모집하고 인산기를 제거합니다. LYN의 인산기를 제거하여 LYN 활성을 조절합니다. 관련 참고문헌: PMID:35767951
• CD45는 항원 제시 세포-T 세포 인터페이스에서 CLEC10A와 상호 작용하여 T 세포 활성화 임계값 조절에 기여하고 자가 반응성을 예방합니다.
• 대안 스플라이싱 이소형(isoform 1~8)은 흉선 세포에서 차등적으로 발현되며, 이소형 1, 2, 3, 5, 7이 검출되고 다른 이소형은 검출되지 않습니다. 다양한 단백질 분자량(131~147 kDa)은 이러한 이소형의 다양성을 반영합니다.
• 세포 내적으로 CD45는 세포막, 막 래프트(membrane rafts), 면역 시냅스에 위치하며 T 세포 수용체 신호 전달의 근위 역할과 일치합니다.
• 숙주 인자로서 CD45는 인간 거대세포바이러스 단백질 UL11에 대한 수용체로 작용하여 T 세포에 대한 바이러스 결합과 후속 T 세포 증식 및 신호 전달 장애를 매개합니다.
• 번역 후 변형에는 과도한 글리코실화(glycosylation), 인산화, 그리고 신호 펩타이드, 트랜스맨브레인 나선, 인접 인산화 효소 도메인의 존재가 포함됩니다.
• CD45는 모든 핵이 있는 조혈 세포에 널리 발현되며 림프구의 발달과 활성화에 필수적이므로 백혈구 식별을 위한 핵심 진단 마커입니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 사용된 면역원(아미노산 26~577)은 여러 이소형 특이적 도메인을 포함한 인간 CD45의 세포 외 영역을 포함합니다. 이 광범위한 영역은 해당 항체가 원형의 다양한 CD45 이소형을 인식할 수 있음을 시사합니다.
• 유세포 분석(FC)의 경우, 최적의 염색 농도를 결정하기 위해 관련 인간 백혈구 하위 집단(예: PBMC, Jurkat 세포)에 대해 항체의 적정(titration)을 고려하십시오. 비특이적 결합을 평가하기 위해 등형 대조군(isotype controls)을 포함하십시오.
• ELISA 응용의 경우, 재조합 CD45 단백질 또는 세포 용해물을 사용하여 직접 또는 샌드위치(capture) 형식을 평가하십시오. 표준 곡선으로 선형성 및 감도를 확인하십시오.
• CD45는 과도하게 글리코실화되어 있으므로, 특정 샘플 유형에서 글리코실화로 인해 항체 결합이 방해받지 않는지 확인하십시오. 변성 조건은 에피토프 접근성에 영향을 줄 수 있습니다.
• 항체는 아이스팩(ice) 상태로 공급됩니다. 안정성을 유지하고 반복적인 냉동-해동 주기를 피하기 위해 권장 온도(예: -20°C)에서 알리쿼트(aliquot)하여 보관하십시오.

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