WB, ELISA용 항-CD64 토끼 단클론 항체 - P12314

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: CD64의 기능과 위치

• CD64는 FcγRI로도 알려져 있으며, 면역글로불린 감마(IgG)의 Fc 영역에 대한 고친화성 수용체입니다. 인간에서 FCGR1A 유전자에 의해 암호화되며 면역글로불린 슈퍼패밀리에 속합니다.
• 이 수용체는 고친화성으로 IgG에 결합하여 체액성 면역과 세포성 면역을 연결하는 중요한 역할을 하며, 단핵구와 대식세포가 IgG로 옵소닌화된 표적을 인식하고 제거할 수 있도록 합니다.
• CD64는 바이러스 감염 세포에 대한 항체 의존성 세포성 세포독성(ADCC)을 포함한 강력한 효과 기능을 매개하여 항바이러스 면역 반응에 기여합니다.
• 이 단백질은 3개의 세포외 면역글로불린 유사 도메인, 단일 막관통 나선 및 짧은 세포질 꼬리로 구성되어 있습니다. 사용된 면역원은 IgG 결합 도메인을 포함하는 세포외 영역(아미노산 16~288)에 해당합니다.
• CD64는 선천성 면역 감시 및 항원 제시에서의 역할과 일치하게 단핵구와 대식세포 표면에 특이적으로 발현됩니다.
• 번역 후 변형으로는 N-연결 당화와 인산화가 포함됩니다. 관찰되는 분자량 범위(45~75 kDa)는 당화 이질성을 반영합니다.
• 대안적 스플라이싱을 통해 여러 아이소폼이 생성되며, 일부는 분비되거나 가용성 수용체로 기능할 수 있습니다.
• 주요 선천성 면역 수용체이자 ADCC의 유발인자로서 CD64는 단핵구/대식세포 활성화에 대한 검증된 바이오마커이며 암 면역치료에서 치료 표적입니다.

실험 가이드 및 기술 팁

• 면역원은 전체 세포외 도메인(아미노산 16~288)을 포함하는 재조합 단백질이므로, 이 항체는 변성된 에피토프뿐 아니라 천연 입체형태도 인식할 가능성이 높습니다. 웨스턴 블롯의 경우, 가변 당화로 인해 45~75 kDa 사이에서 넓은 밴드 또는 여러 밴드로 관찰될 수 있으므로 적절한 단백질 로딩 및 환원 조건을 사용하십시오.
• ELISA의 경우, 항원 공급원으로 재조합 FcγRI 단백질 또는 인간 단핵구 세포주(예: THP-1)의 세포 용해물을 사용하는 것을 고려하십시오. 아이소타입 대조군을 사용하고 과량의 인간 IgG로 블로킹하여 검정 특이성을 검증하십시오.
• CD64 발현은 단핵구/대식세포에 제한되므로, 강력한 신호를 얻으려면 조직 또는 세포 샘플에 이 집단이 풍부하게 포함되어 있는지 확인하십시오. 혼합 백혈구 제제의 경우 CD14로 공동 염색하면 단핵구 동일성을 확인하는 데 도움이 됩니다.
• 이 항체는 인간 CD64와 교차 반응하지만 다른 Fcγ 수용체(CD32, CD16)와는 반응하지 않을 것으로 예상됩니다. 더 넓은 반응성이 필요한 경우, 다른 FcγR 패밀리 구성원의 재조합 단백질에 대해 테스트하십시오.
• ADCC에서의 역할을 고려할 때, 이 항체는 단핵구 매개 사멸을 모니터링하는 기능 분석에 유용할 수 있지만, 차단 또는 활성화 특성은 실험적으로 결정해야 합니다.

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