WB, IF-P, FC(세포내), ELISA용 항-CD68 토끼 단클론 항체 - P34810

주요 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: CD68의 기능과 위치

• CD68는 macrosialin, GP110, LAMP4, SCARD1로도 알려진 고당화화된 I형 막투과 단백질로, 리소좀 연관 막단백질(LAMP) 패밀리에 속합니다.
• 주로 엔도좀 및 리소좀 막에 위치하지만 세포 표면으로 재순환될 수 있어 대식세포에서 빠른 원형질막 발현이 가능합니다.
• 이 단백질은 식균작용에서 중요한 역할을 하며, 삼켜진 물질의 세포내 리소좀 대사를 매개하고 병원체 및 다른 세포와의 세포외 상호작용에 참여합니다.
• CD68는 조직 및 기관 특이적 렉틴 또는 셀렉틴에 결합하여, 특정 해부학적 부위로 대식세포 아집단의 호밍을 촉진하고 대식세포의 부착 및 이동을 지원합니다.
• 엔도좀과 리소좀에서 원형질막으로 CD68가 빠르게 재순환되면 대식세포가 셀렉틴을 보유한 기질이나 다른 세포 위를 기어가는 것을 돕는다고 생각됩니다.
• 혈액 단핵구와 조직 대식세포에서 강하게 발현되지만, 림프구, 섬유아세포, 내피세포 및 많은 종양 세포주에서도 검출되며, 혈관 셀렉틴에 결합하여 종양 세포 확산을 촉진할 수 있습니다.
• 이 단백질은 여러 개의 N-말단 뮤신 유사 도메인, 하나의 막투과 나선, 짧은 세포질 꼬리를 가지고 있으며, 광범위한 N- 및 O-당화화와 여러 분자내 이황화 결합을 가집니다.

실험 가이드 및 기술 팁

• 면역원은 인간 CD68 (NP_001242.2)의 100–200 잔기를 포함하는 합성 펩타이드입니다. 이 영역의 서열 보존성이 마우스 및 래트와의 교차 반응성의 원인일 가능성이 높습니다.
• 웨스턴 블롯(WB)의 경우, 비당화 백본의 예상 분자량은 ~37 kDa이지만, 고당화 형태는 종종 더 높은 겉보기 분자량(80–110 kDa)으로 이동합니다. 적절한 차단과 분자량 마커 사용을 권장합니다.
• 면역형광(IF-P)과 세포내 유세포 분석(FC)에서는 CD68가 주로 엔도좀 및 리소좀 구획에 존재하기 때문에 투과화가 필수적입니다; 표면 염색시 재순환 역학을 고려해야 합니다.
• ELISA 성능은 에피토프 접근성에 따라 달라집니다. 고당화가 항체 결합을 차단하거나 변경할 수 있으므로 매트릭스 효과와 코팅 조건을 최적화해야 합니다.
• 단핵구/대식세포 계통에서 광범위하게 발현되므로, 원하는 샘플 시스템에서 특이성을 확인하기 위해 관련 양성 대조군(예: THP-1 또는 RAW 264.7 세포)과 동형 대조군을 포함하세요.

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