WB, IP, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA용 Anti-CDK4 Rabbit PolymAb® - P11802

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: CDK4 기능 및 국재화

• CDK4 (사이클린 의존성 키나제 4, Cyclin-dependent kinase 4)는 세포 분열 단백질 키나제 4 또는 PSK-J3로도 알려져 있으며, 사람의 CDK4 유전자에 의해 암호화되는 세린/트레오닌 단백질 키나제입니다.
• 사이클린 D-CDK4 복합체의 촉매 소단위로서, CDK4는 세포 주기의 G1/S 전이 기간 동안 망막아세포종(RB) 단백질 패밀리 구성원, 특히 RB1을 인산화하여 억제합니다.
• CDK4에 의한 RB1의 인산화는 E2F 전사 인자를 방출하여 S기 진입 및 세포 주기 진행에 필요한 유자의 전사를 가능하게 합니다.
• CDK4는 또한 세포 주기 의존적인 방식으로 SMAD3를 인산화하여 그 전사 활동을 억제하고 유사 분열 촉진 신호와 유사 분열 억제 신호를 통합합니다.
• 세포 내 국재화에는 세포질, 세포핵 및 핵막이 포함되며, 3원 복합체인 사이클린 D/CDK4/CDKN1B에 의해 세포핍으로의 이동이 촉진됩니다.
• UniProt의 키워드는 ATP 결합, 세포 주기, 세포 분할에서의 역할과 아세틸화 및 인산화에 의한 조절을 강조하며; 질병 변이는 암과 연결됩니다.
• 예상 분자량은 약 34 kDa (UniProt: 33.7 kDa)이며, 대체 스플라이싱으로 인해 추가적인 이소폼이 생성될 수 있습니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 사람 CDK4의 아미노산 204-303에 해당하는 합성 펩타이드입니다. 사용하는 분석 방식에서 표적 에피토프에 접근 가능한지 확인하십시오. 웨스턴 블로팅의 경우 변성 및 환원 조건이 필요할 수 있습니다.
• 웨스턴 블롯(WB)의 경우, 사람, 마우스 또는 쥐 세포주의 용해물에서 약 34 kDa 대역이 예상됩니다. 적절한 양성 대조군 및 음성 대조군을 사용하여 대역 특이성을 확인하십시오.
• 면역침전(IP)의 경우, 항체 대 용해물 비율을 최적화하고 풀다운 효율을 평가하기 위해 관련 대조군 항체를 포함하십시오.
• 면역형광(IF/ICC) 및 면역조직화학(IHC-P)의 경우, 증식하는 세포에서 알려진 CDK4 세포 내 분포(세포핵 및 세포질)에 대해 염색 패턴을 검증하십시오.
• ELISA 적용의 경우 적절한 검출 항체와 재조합 CDK4 단백질을 사용한 표준 곡선이 필요할 수 있습니다.
• 특정 샘플 및 프로토콜에 대한 최적의 작업 농도를 결정하기 위해 항상 예비 적정 실험을 수행하십시오.

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