웨스턴 블롯 및 ELISA용 항-CDK8 토끼 단일클론 항체 - P49336

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: CDK8 기능 및 위치

• CDK8은 사이클린 의존성 키나제이며, 거의 모든 RNA 중합효소 II 의존 유전자의 조절된 전사에 필수적인 공활성제인 매개체 복합체의 핵심 구성 요소입니다.
• 이는 유전자 특이적 조절 단백질과 기초 전사 기계를 연결하며, RNA 중합효소 II 및 일반 전사 인자와 함께 전사 개시 복합체의 조립을 비계로 만듭니다.
• CDK8은 RNA 중합효소 II의 C-말단 도메인(CTD)을 인산화하여, 전사 억제제 역할을 하며 전사 개시 복합체 형성을 억제할 수 있습니다. 관련 참고문헌: PMID:10993082
• 이는 CCNH를 인산화하여 TFIIH 복합체의 하향 조절 및 전사 억제를 유도합니다. 관련 참고문헌: PMID:10993082
• MAML1과의 상호작용을 통해, CDK8은 NOTCH의 세포내 도메인을 과인산화하여 그 분해를 촉진합니다. 관련 참고문헌: PMID:15546612
• CDK8은 STAT1 전사활성화 도메인을 인산화함으로써 인터페론 반응을 선택적으로 조절합니다.
• 주로 핵에 위치하는 CDK8은 세린/트레오닌 단백질 키나제로 활성제 및 억제제 역할을 하며, 유전적 변이는 자폐 스펙트럼 장애 및 지적 장애와 연관되어 있습니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원은 사람 CDK8의 아미노산 364–464에 해당하며, 이 영역은 특이성을 제공할 수 있습니다. 대상 시스템에서 에피토프 고유성을 확인하는 것을 고려하십시오.
• 웨스턴 블롯팅의 경우, 알려진 CDK8 양성 리세이트(예: HeLa 또는 HEK293 세포)를 사용하여 항체 희석을 최적화하고 예상되는 ~53 kDa 밴드를 확인하십시오. 적절한 로딩 대조군을 포함해야 합니다.
• ELISA의 경우, 재조합 CDK8 단백질 또는 세포 리세이트를 코팅하고 농도 범위에 걸쳐 신호 선형성을 검증하십시오. 마우스 CDK8과의 교차 반응성은 이중 종 분석을 지원합니다.
• 이것은 재조합 토끼 단일클론 항체이므로, 배치 간 높은 재현성을 기대할 수 있습니다. 그럼에도 불구하고, 새로운 실험 조건에 적용할 때 성능을 재검증하십시오.
• CDK8은 동적인 인산화 사건에 관여하므로, 인산신호 상태를 보존하기 위해 샘플 준비 중 포스파타제 억제제 칵테일 사용을 고려하십시오.

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