Anti-CDKN1A/p21CIP1 토끼 단일클론 항체 (WB, IHC-P, ELISA용) - P38936

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: CDKN1A/p21CIP1 기능 및 국소화

• 사이클린 의존성 키나아제 억제제 1(Cyclin-dependent kinase inhibitor 1)은 CDKN1A로 지정되며, p21, CIP1, WAF1, SDI1, CAP20, CDKN1 및 MDA-6로도 알려져 있습니다. 이는 세포 주기의 강력한 조절 인자로 기능합니다.
• CDKN1A는 DNA 손상에 대한 반응으로 p53/TP53 매개 세포 주기 억제(cell cycle arrest)에서 중요한 역할을 하여 G1/S 진행을 차단하고 DNA 복구를 가능하게 합니다 (PubMed:9106657). 관련 참고문헌: PMID:9106657
• 이 단백질은 사이클린 의존성 키나아제(CDK) 복합체에 결합하여 억제하며, RB1와 같은 주요 기질의 인산화를 방지함으로써 세포 주기 진행을 멈춥니다.
• 낮은 화학량론적 비율에서 CDKN1A는 사이클린 D-CDK4 복합체의 핵 내 국소화 및 조립을 촉진하여 RB1에 대한 키나아제 활성을 향상시키는 반면, 더 높은 비율에서는 복합체를 억제합니다.
• CDKN1A는 증식 세포 핵 항원(PCNA)에 결합하는 POLD3과 경쟁하여, DNA 폴리머라아제 델타(DNA polymerase delta)에 의한 DNA 합성을 억제하는 결과를 초래합니다 (PubMed:11595739). 관련 참고문헌: PMID:11595739
• 이 단백질은 주로 핵에 국소화하지만 세포질에서도 발견됩니다. 핵 내 국소화는 CDK 억제에 필수적이며, 그 활성은 인산화, 아세틸화 및 유비퀴틴화를 포함한 번역 후 변형에 의해 조절됩니다.
• CDKN1A는 성인 조직에 널리 발현하며, 뇌에서는 다른 조직에 비해 약 5배 낮은 수준을 보입니다.
• 전형적인 역할 외에도 CDKN1A는 별아교세포(astrocytes) 및 조골세포(osteoblasts)에서 CREB3L1 경로를 통해 p53 비의존성 DNA 손상 유발 G2 억제에 참여합니다 (유사성에 의함, By similarity).

실험 가이드 및 기술적 팁

• 항원은 전장 단백질을 포함하는 인간 CDKN1A/p21CIP1의 N-말단 164개 아미노산으로 구성됩니다. 웨스턴 블롯을 통해 이 항체가 내인성 p21을 약 18 kDa에서 검출하는지 확인하십시오.
• 면역조직화학(IHC-P)의 경우 핵 및 세포질 염색 모두 관찰될 수 있습니다. 결장암(colon carcinoma) 또는 증식 세포와 같은 알려진 양성 대조 조직을 사용하여 항원 회복(antigen retrieval) 및 항체 희석을 최적화하십시오.
• ELISA 응용의 경우 표준 곡선을 설정하고 특이성을 검증하기 위해 재조합 p21 단백질 또는 p53 활성화 샘플의 세포 용해물을 사용하십시오.
• p21 발현은 p53 및 세포 스트레스에 의해 엄격하게 조절되므로, 검출 전에 p21을 유도하기 위해 DNA 손상 제제(예: 독소루비신)로 세포를 처리하는 것을 고려하십시오.

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