WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA용 Anti-CGRP 폴리클로날 항체 - P01258 / P06881

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: CGRP(칼시토닌 유전자 관련 펩타이드) 기능 및 국소화

• CALCA 유전자는 대체 스플라이싱을 통해 두 가지 펩타이드 호르몬인 칼시토닌과 칼시토닌 유전자 관련 펩타이드(CGRP, CGRP1, CGRP-alpha, CGRP-I라고도 함)를 생성합니다. 이 항체는 CGRP 아이소폼을 특이적으로 인식합니다.
• 동일한 유전자에 의해 암호화된 칼시토닌은 칼슘과 인산의 뼈로의 침착을 촉진하여 혈중 칼슘 및 인산 수치를 급격히 낮추는 32개의 아미노산으로 구성된 펩타이드 호르몬입니다. 그러나 이 항체는 CGRP 특이 서열에 대해 생성되었습니다.
• 칼시토닌 신호 전달은 칼시토닌 수용체(CALCR) 및 CALCR-RAMP2 (AMYR2) 수용체 복합체를 통해 매개됩니다 (PubMed:35324283). 관련 참고문헌: PMID:35324283
• 전구체에서 절단된 또 다른 산물인 카타칼시킨(Katacalcin) 또한 혈중 칼슘 농도를 낮추는 활성을 나타냅니다.
• UniProt에 따르면, 이 단백질은 분비되며 아미드화, 이황화 결합 형성 및 인산화를 포함한 주요 번역 후 변형을 거칩니다.
• 면역원은 전구 펩타이드(prepropeptide)의 잔기 49~128을 포함하며 성숙한 CGRP 영역을 포괄합니다. 따라서 이 항체는 관련 샘플에서 전구체 및 성숙한 CGRP 형태를 모두 검출할 것으로 예상됩니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 CGRP 전구 영역(aa 49-128)에 걸친 합성 펩타이드입니다. 웨스턴 블랏의 경우, 전구체 형태에 해당하는 ~13 kDa 및/또는 ~15 kDa 밴드가 관찰될 수 있으며, 성숙한 CGRP(~3.8 kDa)는 염색 전선(dye front) 부근에서 이동할 수 있습니다.
• 성숙한 CGRP의 검출이 필요한 경우, 저농도 트리신 겔(tricine gels) 또는 특수 전기영동 시스템을 사용하여 작은 펩타이드를 분해하는 것을 고려하십시오.
• CGRP는 크기가 작고 고도로 변형된 펩타이드이므로, 우유 대신 BSA를 사용하여 블로킹하면 배경 잡음을 줄일 수 있습니다.
• 면역조직화학 및 면역형광의 경우, 조직에 적합한 항원 회복을 수행하고 CGRP 양성 조직(예: 감각 뉴런, 심혈관 조직)에서 염색을 검증하십시오.
• 마우스 및 랫트와의 교차 반응성이 보고되었으나, 내인성 발현 수준은 조직 및 질병 상태에 따라 다르므로 샘플 준비의 최적화가 권장됩니다.

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