WB, ELISA용 항-Chk1 다클론 항체 - O14757

주요 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: Chk1의 기능과 위치

• Chk1(체크포인트 키나아제 1)은 세린/트레오닌 단백질 키나아제로 단백질 키나아제 superfamily의 구성원이며, 보존된 키나아제 도메인과 ATP 결합 포켓을 가지고 있습니다.
• DNA 손상 또는 복제되지 않은 DNA에 대한 반응으로 체크포인트 매개 세포주기 정지 및 DNA 복구 활성화에 필요하며, 기질 공통 서열 [R-X-X-S/T]을 인식합니다. 관련 참고문헌: PMID:11535615 PMID:12399544 PMID:12446774
• Chk1은 CDC25 포스파타아제(CDC25A, CDC25B, CDC25C)를 인산화시켜 14-3-3 결합 부위를 생성하고 CDC25A 단백질분해를 촉진합니다. 이를 통해 CDK-사이클린 복합체를 억제하고 세포주기 진행을 차단합니다. 관련 참고문헌: PMID:12676583 PMID:12676925 PMID:12759351 PMID:9278511 PMID:19734889 PMID:20090422
• Chk1에 의한 TP53의 여러 C-말단 부위 인산화는 아세틸화와 활성화를 촉진하여 세포주기 정지와 증식 억제를 유도합니다. 관련 참고문헌: PMID:10673501 PMID:15659650 PMID:16511572
• Chk1은 RAD51의 Thr-309를 인산화시켜 상동 재조합을 강화하고, FANCE를 인산화시켜 DNA 가교 복구를 촉진하며, PCNA를 통해 복제 fork 유지를 조절함으로써 DNA 복구에 직접적인 역할을 수행합니다. 관련 참고문헌: PMID:15665856 PMID:17296736 PMID:18451105
• Chk1은 TLK1의 Ser-743를 인산화시켜 ASF1A 인산화를 막고 크로마틴 조립을 향상시킬 수 있으며, 히스톤 H3.1의 Thr11를 인산화시켜 유전자 전사를 조절함으로써 크로마틴을 조절합니다. 관련 참고문헌: PMID:12660173 PMID:12955071
• CHEK1의 대체 스플라이싱 동형체는 전장 Chk1의 내인성 억제제로 작용하며, 직접적인 상호작용과 길항작용을 통해 S기에서 G2/M기 전이를 촉진합니다.
• Chk1은 핵, 염색체, 세포질 및 중심체에 위치합니다. 전신에 널리 발현되며 흉선, 고환, 소장 및 대장에서 가장 높은 수준으로 발현됩니다.

실험 가이드 및 기술 팁

• 웨스턴 블로팅의 경우 환원 조건을 사용하고, 흉선이나 고환처럼 Chk1이 발현되는 것으로 알려진 세포나 조직에서 용해물을 준비하십시오. 예상 분자량은 약 54 kDa이지만, 번역 후 변형으로 인해 겉보기 이동이 발생할 수 있습니다.
• 면역원은 키나아제 도메인 내에 위치하는 인간 Chk1의 아미노산 148-307에 해당합니다. 이 영역은 표준 동형체에서 고도로 보존되어 있지만, 잠재적인 대체 동형체와의 반응성을 평가하기 위해 적절한 대조군을 사용한 검증을 권장합니다.
• 이 토끼 다클론 항체는 ELISA와 WB에서 검증되었습니다. ELISA 응용의 경우, 표준물로 재조합 Chk1 단백질 또는 단편을 사용하는 것을 고려하고, 특정 검사 형식에 맞춰 항체 희석과 차단 조건을 최적화하십시오.
• 다클론 항체의 특성상 로트 간 변동이 발생할 수 있습니다. 실험 시스템에서 성능을 검증하고 적절한 양성 및 음성 대조군을 포함할 것을 권장합니다.

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