WB, IF/ICC, ELISA용 Anti-Cleaved PARP (Asp214) 단클론 항체 - P09874

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: PARP1 기능 및 위치

• PARP1은 핵 내 poly-ADP-ribosyltransferase로, 기질 단백질의 poly-ADP-ribosylation을 매개하여 DNA 수리, 염색질 재구성, 게놈 안정성에 중심적인 역할을 합니다 (PubMed:17177976, PubMed:18055453, PubMed:18172500). 관련 참고문헌: PMID:17177976 PMID:18055453 PMID:18172500
• 이는 세린-, 글루탐산-, 및 티로신 연결 ADP-ribosylation을 촉매하며, 잔기 특이성은 공인자 HPF1과 NMNAT1에 의해 결정됩니다 (PubMed:28190768, PubMed:32028527, PubMed:29954836). 관련 참고문헌: PMID:28190768 PMID:32028527 PMID:29954836
• DNA 수리에서 PARP1은 가닥 절단을 감지하고, 수리 인자를 모집하며, 염색질 이완을 촉진하여 염기 절제 및 이중 가닥 절단 수리를 용이하게 합니다 (PubMed:26344098, PubMed:30356214, PubMed:19344625). 관련 참고문헌: PMID:26344098 PMID:30356214 PMID:19344625
• 세포사멸 동안 PARP1은 caspase-3 및 -7에 의해 Asp214에서 절단되어 대략 89 kDa의 큰 촉매 절편을 생성하며, 이는 세포질로 이동하여 poly-ADP-ribose 운반체 역할을 하며 AIFM1 매개 세포사멸을 유발합니다 (PubMed:33168626). 관련 참고문헌: PMID:33168626
• 정상 조건에서 세포 내 위치는 주로 핵 및 핵소체입니다. 절단 후, 촉매 절편은 세포질로 재위치합니다.
• PARP1은 아세틸화, ADP-ribosylation (자동변형), 인산화, 유비퀴틴화를 포함한 광범위한 번역 후 변형을 거쳐 그 활성과 상호작용을 조절합니다.
• DNA 수리 외에도, PARP1은 단백질 활성과 염색질 구조를 조절함으로써 전사 조절, 복제 분기점 진행, 지방 생성, 선천 면역에서 기능합니다 (PubMed:15607977, PubMed:22464733, PubMed:35460603). 관련 참고문헌: PMID:15607977 PMID:22464733 PMID:35460603

실험 지침 및 기술 팁

• 이 항체는 Asp214의 네오-에피토프를 표적으로 하므로, 전장 PARP보다는 절단된 PARP 절편을 특이적으로 검출합니다. 웨스턴 블롯의 경우, 대략 89 kDa 절편을 농축시키기 위해 세포를 세포사멸 유도제(예: 스타우로스포린 또는 에토포사이드)로 처리하십시오.
• 면역형광/ICC의 경우, 절단된 절편의 세포질 내 위치를 관찰하기 위해 세포사멸 유도 후 고정을 고려하십시오. 적절한 대조군을 사용하여 귀하의 실험 시스템에서 염색 특이성을 검증하십시오.
• ELISA 적합성이 보고되었습니다; 분석법을 설계할 때, 표준물질로 재조합 절단 PARP 절편 또는 펩타이드를 사용하고 코팅 및 검출 조건을 최적화하도록 고려하십시오.

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