WB, ELISA용 항CLOCK 토끼 다클론 항체 - O15516

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: CLOCK 기능 및 세포내 위치

• CLOCK(일주기 운동 출력 주기 단백질 Kaput)은 bHLHe8로도 알려져 있으며, 유전자 발현, 대사 및 행동에서 약 24시간 리듬을 유도하는 분자 일주기 시계의 핵심 구성 요소입니다(UniProt O15516).
• 전사/번역 피드백 루프의 양성 팔로서, CLOCK은 BMAL1(또는 BMAL2)과 이종이량체를 형성하여 핵심 시계 유전자(PER1/2/3, CRY1/2) 및 시계 조절 유전자의 프로모터에 있는 E-box 요소(5'-CACGTG-3')에 결합하여 전사를 활성화합니다.
• CLOCK-BMAL1 이종이량체는 5'-CACGTGA-3' 모티프를 우선적으로 인식하는데, 여기서 CLOCK은 5'-CAC-3' 반 사이트에 결합하고 BMAL1은 5'-GTGA-3' 반 사이트에 결합합니다; 비표준 모티프인 5'-AACGTGA-3'와 5'-CATGTGA-3'도 인식됩니다. 관련 참고문헌: PMID:23229515
• CLOCK은 고유의 히스톤 아세틸전이효소 활성을 가지고 있어 히스톤(예: H3, H4)과 BMAL1 자체를 포함한 비히스톤 단백질을 아세틸화함으로써 일주기 염색질 재구성이 가능하며, 이러한 활성은 리듬 생성에 있어 전사만큼이나 중요합니다.
• 아르기니노숙시네이트 합성효소 1(ASS1)을 일주기적으로 아세틸화하여 효소 활성을 억제하고 아르기닌 생합성 및 요소 생성의 리듬 조절을 유도하여 시계를 대사와 연결합니다. 관련 참고문헌: PMID:28985504
• CLOCK은 수용체의 힌지 영역에 있는 여러 리신 잔기를 아세틸화하여 글루코코르티코이드 수용체 NR3C1/GR의 전사 활성을 억제하고, 글루코코르티코이드 반응 요소와의 결합을 감소시킵니다. 관련 참고문헌: PMID:21980503
• 세포내에서는 주로 핵에 존재하지만 세포질과 세포액에서도 검출됩니다. 고환과 골격근에서 가장 높은 수준으로 널리 발현되며, 중추 시계인 뇌의 시교차상핵(SCN)에 고도로 농축되어 있습니다.
• 인산화, 아세틸화, 유비퀴틴화를 포함한 번역 후 변형은 CLOCK의 안정성과 활성을 미세 조정하여 일주기 리듬의 정확한 진동 조절에 기여합니다.

실험 가이드 및 기술 팁

• 면역원은 인간 CLOCK의 아미노산 450-600에 해당하며, 이 영역은 아세틸전이효소 도메인의 인식을 보장하고 전장 길이 및 잠재적인 아이소폼 모두를 검출하는 데 도움이 될 수 있습니다. 관련 종 및 조직에서 반응성을 확인하시는 것을 권장합니다.
• 웨스턴 블롯의 경우 CLOCK의 예상 분자량은 95 kDa이지만, 번역 후 변형(예: 인산화, 아세틸화)으로 인해 관찰되는 밴드가 이동할 수 있습니다. 토끼 다클론 항체에 최적화된 적절한 차단 및 검출 완충액을 사용하십시오.
• ELISA의 경우, 재조합 단백질 또는 펩티드 코팅이 면역원 영역과 일치하여 항체 포획을 극대화하도록 하십시오. 사용하시는 분석 시스템에서 최적 작동 농도를 결정하기 위해 항체를 적정하십시오.
• 인간, 마우스, 래트에 대해 교차 반응성이 보고되었습니다. 선택하신 모델 생물에서 양성 및 음성 대조군을 사용하여 유효성을 검증하십시오. CLOCK 발현은 일주기적이므로 내인성 수준을 검사할 때는 수확 시간을 고려하십시오.

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