Anti-Complement C4A Rabbit Monoclonal Antibody for WB, IF-P, ELISA - P0C0L4

주요 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: Complement C4-A 기능 및 국소화

• Complement C4-A는 고전적 경로, 렉틴 경로 및 GZMK 보체 경로의 비효소적 구성 요소로, 단백질 분해에 의해 활성화되어 선천성 면역 방어에 참여하는 전구체 역할을 합니다.
• C1S, MASP2 또는 GZMK와 같은 보체 단백질 분해 효소에 의해 절단되면 C4b를 생성하며, C4b는 병원체 표면에 공유 결합하여 옵소닌으로 작용하여 항원이 제거되도록 표시합니다. 관련 참고문헌: PMID:8538770 PMID:27738201
• C4b는 이어서 보체 C2b를 모집하여 C3 및 C5 컨버타제(C3 and C5 convertases)를 형성하며, 이는 C3와 C5를 절단 및 활성화하여 보체 캐스케이드를 확장시킵니다. 관련 참고문헌: PMID:12878586 PMID:18204047 PMID:2387864
• 활성화 중 방출되는 C4a 단편은 구조적으로 아나필라톡신(anaphylatoxins)과 유사하지만, 그 역할은 명확하지 않으며 염증 매개체 기능에 대한 초기 보고는 오염 물질에 기인했을 수 있습니다. 관련 참고문헌: PMID:6167582 PMID:25659340
• Complement C4-A는 주로 간세포(hepatocytes)에서 분비되며 간에서 가장 높은 발현을 보입니다; 부신, 갑상선 및 신장과 같은 조직에서의 간외 합성은 국소 면역 보호에 기여합니다. 관련 참고문헌: PMID:11367523
• 세포 내적으로는 세포외 공간으로 분비되며, 시냅스, 신경 축색돌기(axons), 수상돌기(dendrites) 및 세포 표면에도 국재화되어 있습니다.
• 이 단백질은 이황화 결합 형성, 당화(glycosylation), 인산화 및 황산화를 포함한 여러 번역 후 변형을 거치며, 표적 표면에 공유 결합하는 데 필수적인 반응성 티오에스터 결합을 포함하고 있습니다.
• 전신성 홍반성 루푸스(systemic lupus erythematosus)의 질병 변이와 관련이 있으며 혈액형 항원 결정인자를 운반합니다; 대체 스플라이싱(alternative splicing)으로 인해 여러 이소형이 존재합니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 C-말단 단편(aa 940-1237)에 해당하며 이는 이소형 특이성을 부여할 수 있습니다. 그러나 상동성이 높은 C4B와의 교차 반응성은 실험적으로 검증되어야 합니다.
• 웨스턴 블로팅의 경우, 고분자량 타겟(~193 kDa)을 효율적으로 분리하고 전이하기 위해 저백분율 폴리아크릴아마이드 겔과 전이 시간을 연장하여 사용하십시오.
• 면역형광(IF-P)에서 C4A는 분비되어 세포 표면에 침착될 수 있으므로, 세포 내 및 표면 결합 단백질을 모두 검출하도록 고정 및 투과화 조건을 최적화하십시오.
• ELISA의 경우 이 항체는 포획(capture) 또는 검출(detection) 시약으로 사용할 수 있습니다. 샌드위치 ELISA 개발을 위해 중복되지 않는 에피토프를 표적으로 하는 다른 클론과 페어링하십시오.
• 보체 활성화는 C4를 소모할 수 있으므로, 원래의 단백질 수준을 유지하기 위해 샘플 처리 및 보관 조건을 고려하십시오.

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