WB용 항COX5B 토끼 단클론 항체 - P10606

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: COX5B의 기능과 위치

• COX5B(시토크롬 c 옥시다제 서브유닛 5B)는 전자전달계의 말단 효소인 미토콘드리아 콤플렉스 IV(시토크롬 c 옥시다제)의 핵 코딩 서브유닛입니다.
• 분자 산소를 물로 환원시키는 촉매 작용을 하는 다중 서브유닛 시토크롬 c 옥시다제 복합체의 구성 요소이며, 이 반응을 미토콘드리아 내막을 통한 양성자 펌핑과 연결합니다.
• COX5B 단백질은 미토콘드리아 이동 펩티드와 함께 합성된 후 미토콘드리아로 들어온 다음 절단되어, 미토콘드리아 내막에 통합되는 성숙한 서브유닛이 됩니다.
• 세포 내 위치는 미토콘드리아 내막으로 제한되며, 여기서 콤플렉스 IV의 구조적·기능적 온전성에 기여합니다.
• 번역 후 변형으로는 아세틸화가 포함되며, 결정 구조에 아연 이온이 존재하는 것으로 확인된 것처럼 성숙 단백질에는 아연 결합 부위가 있습니다.
• 성숙한 인간 COX5B의 이론적 분자량은 약 13.7 kDa로, SDS-PAGE에서 관찰되는 13 kDa 밴드와 일치합니다.
• 호흡 사슬의 핵심 서브유닛으로서 COX5B는 효율적인 산화적 인산화와 ATP 생산에 필수적이며, 그 발현은 종종 미토콘드리아 질량과 활성의 마커로 사용됩니다.

실험 가이드 및 기술 팁

• 면역원은 인간 COX5B의 29~129번 아미노산에 걸쳐 있으며, 이는 미토콘드리아 표적 펩티드가 제거된 성숙 가공 단백질에 해당하므로 내인성 가공 형태를 인식하는 항체가 생성될 가능성이 높습니다.
• 웨스턴 블로팅의 경우 인간, 생쥐, 래트의 미토콘드리아가 풍부한 조직(예: 심장, 골격근, 간) 용해물에서 약 13 kDa 부근에 밴드가 예상됩니다. 최적의 검출을 위해 미토콘드리아 분획이 농축된 시료를 사용하십시오.
• 면역조직화학(IHC-P)과 면역형광(IF/ICC)의 경우 염색은 미토콘드리아 위치와 일치하는 점상 세포질 패턴을 보여야 합니다. 검증을 위해 미토콘드리아 마커로 대조염색하는 것을 권장합니다.
• 면역침전(IP) 실험에서 이 항체는 다른 콤플렉스 IV 서브유닛을 공동면역침전할 수 있습니다. 고유 복합체의 온전성을 유지하려면 온화한 세제를 사용하는 것을 고려하십시오.
• ELISA 반응성은 세포나 조직 용해물에서 COX5B를 정량적으로 검출하는 데 사용할 수 있지만, 알려진 표준물질로 성능을 검증해야 합니다.
• 생쥐와 래트에 대한 교차반응성이 확인되었지만, 잠재적인 서열 변이로 인해 항상 자신의 실험 시스템에서 종 특이적 반응성을 검증하십시오.

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