WB, IF/ICC, ELISA용 Anti-CRY2 토끼 다클론 항체 - Q49AN0

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: CRY2의 기능 및 위치

• 크립토크롬-2(CRY2)는 생체시계의 핵심 구성 요소로, 전사/번역 피드백 루프(TTFL)의 음성 조절 단계에서 전사 억제인자로 작용합니다. CLOCK/BMAL1 이량체와 상호작용하여 전사 활성을 억제합니다.
• CRY1과 함께 CRY2는 생체시계 주기를 조절합니다. 두 단백질은 중복 기능을 가지지만, CRY2는 소뇌와 간에서 억제 활성이 더 약하며, CRY1의 작용에 반대하여 시교차상핵(SCN)의 생체시계 주기를 조정하는 데 중요한 역할을 합니다.
• CRY2는 포도당 및 지질 대사 조절에 관여하며, 골격근에서 PPARD 표적 유전자를 억제하고 LEP 및 ACSL4와 같은 유전자를 조절합니다.
• CRY2는 글루코코르티코이드 반응 요소에 결합하여 글루코코르티코이드 수용체(NR3C1/GR)에 의해 유도되는 전사 활성을 억제하며, CLOCK-BMAL1에 의해 유도되는 BHLHE40/DEC1 및 NAMPT의 전사도 억제합니다.
• 세포 내에서 CRY2는 세포질과 핵 모두에 위치하며, 생체시계 조절의 일부로 두 구획 사이를 이동할 수 있습니다.
• 인산화 및 유비퀴틴화를 포함한 번역 후 변형은 CRY2의 생체시계 주기(tau)와 안정성을 결정하는 데 중요합니다.
• CRY2는 인간 조직에 광범위하게 발현되며, 심장과 골격근에서 가장 높은 수준으로 발현되고 뇌, 간, 신장 및 기타 여러 조직에도 존재합니다.
• 이 단백질은 FAD에 결합하며 광수용체 특성을 가질 수 있지만, 포유류에서는 주로 생체시계 기전 내 전사 조절 역할을 수행합니다.

실험 지침 및 기술적 팁

• 면역원은 C-말단 영역(455~614번 아미노산)에 해당하며, 변성 조건에서 잘 노출될 수 있습니다. 웨스턴 블롯에서 67kDa 밴드를 검출하려면 환원 조건의 SDS-PAGE를 사용하는 것을 고려하십시오.
• 면역형광/ICC의 경우 CRY2가 세포질과 핵 모두에 위치하므로 고정 및 투과화 프로토콜을 최적화하십시오. 메탄올 또는 Triton X-100을 사용한 파라포름알데히드 처리에서 서로 다른 결과가 나타날 수 있습니다.
• 정량에는 ELISA를 사용할 수 있습니다. 일치하는 항체 쌍을 이용한 샌드위치 ELISA 방식을 고려하고, 재조합 CRY2 단백질을 사용하여 선형성과 민감도를 검증하십시오.
• 인간 및 랫드 샘플에서 교차 반응성이 확인되었습니다. 다른 종을 사용할 경우 서열 정렬을 수행하고 해당 샘플 시스템에서 검증하십시오.
• 항체 특이성을 확인하기 위해 적절한 양성 대조군(예: HEK293, HeLa 세포 용해물)과 음성 대조군(siRNA 녹다운 또는 녹아웃 샘플)을 포함하십시오.

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