WB, IF/ICC, IP, ELISA, ChIP, ChIP-seq, CUT&Tag용 Anti-CTCF 토끼 단일클론 항체 - P49711

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: CTCF 기능 및 위치

• CCCTC-결합 인자 또는 11-아연 손가락 단백질(11-zinc finger protein)로도 알려진 CTCF는 서열 특이적 DNA 부위에 결합하여 루프를 형성하고 DNA를 핵 구조에 고정함으로써 염색질의 3D 구조를 조절하는 염색질 결합 인자입니다. 관련 참고 문헌: PMID:16949368, PMID:18347100, PMID:18654629
• 염색질 절연체(chromatin insulators)에 결합하여 활성 염색질과 이질 염색질 사이의 경계를 정의하며, 프로모터와 인접한 인핸서 및 사일런서 간의 상호작용을 방지하여 장거리 유전자 침묵을 매개합니다. 관련 참고 문헌: PMID:18347100, PMID:18654629, PMID:19322193
• CTCF는 각인된 IGF2/H19 유전자좌에서 대립유전자 특이적 유전자 발현에 참여하며, 고차 염색질 구조를 매개하고 모계 대립유전자에서 IGF2로의 인핸서 접근을 제한합니다. 관련 참고 문헌: PMID:16107875, PMID:16815976, PMID:17827499
• 조절 가능한 후성유전학적 스위치를 확립하고 탈출 유전자(escape genes)에서 안정적인 메틸화 확산을 방지함으로써 X-염색체 불활성화에 중요한 역할을 합니다. 관련 참고 문헌: PMID:11743158
• CTCF는 주로 핵에 위치하며 중기 동안 동원체 및 염색체 팔과 연관되어 코헤신 국소화 및 자매 염색분체 응집에 필요합니다. 관련 참고 문헌: PMID:18550811, PMID:26321640
• MYC 및 BAG1의 전사 억제제이자 APP의 전사 활성제로 작용하여 이중 조절 기능을 보여줍니다. 관련 참고 문헌: PMID:8649389, PMID:9591631, PMID:9407128
• 이 단백질은 아세틸화, 인산화 및 수모일화(이소펩타이드 결합)를 포함한 다수의 번역 후 변형 부위를 포함하며, 이는 염색질 결합 및 전사 활동을 조절합니다.
• CTCF는 인간 조직 전반에 걸쳐 발현되지만 일차 정모세포에서는 눈에 띄게 부재하여 조직 특이적 조절 역할을 나타냅니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원은 인간 CTCF의 C-말단 영역인 628–727 아미노산에 걸쳐 있으며, 이는 아연 손가락 DNA 결합 영역과는 다른 도메인으로, 다른 아연 손가락 단백질보다 내인성 CTCF에 대한 항체 특이성을 높일 수 있습니다.
• 웨스턴 블로팅의 경우 약 83 kDa에서 밴드가 예상됩니다. 번역 후 변형이나 젤 조건에 따라 실제 이동 거리가 다를 수 있으므로 알려진 양성 대조군으로 검증하십시오.
• 염색질 면역침강(ChIP) 및 ChIP-seq의 경우, 세포 유형에 맞는 가교 및 염색질 전단 조건을 최적화하고 농축 정도를 평가하기 위해 양성(예: H19 ICR) 및 음성 대조군 유전체 영역을 포함하십시오.
• 면역형광법 수행 시, 강력한 핵 염색을 보장하기 위해 고정 및 투과 프로토콜을 경험적으로 테스트해야 합니다. 핵 및 동원체로의 세포 내 위치를 관찰할 수 있습니다.
• 이 항체는 CUT&Tag에 적합하며, 더 적은 세포 입력으로 ChIP-seq의 효율적인 대안을 제공합니다. 최적의 결과를 위해 효소 태깅 조건 및 항체 농도 검증을 권장합니다.

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