웨스턴 블롯용 Anti-DHFR 폴리클론항체 - P00374

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: DHFR 기능 및 세포 내 위치

• DHFR는 NADPH 의존적으로 7,8-다이하이드로폴레이트를 5,6,7,8-테트라하이드로폴레이트로 환원시키는 반응을 촉매하며, 이는 일탄소 대사에서 중요한 단계입니다. 관련 참고문헌: PMID:12096917 PMID:15039552 PMID:17569517
• 이 반응은 티미딜레이트, 글리신, 퓨린의 신합성에 필수적이며, 핵 및 미토콘드리아 게놈을 위한 DNA 전구체를 제공합니다. 관련 참고문헌: PMID:21876188 PMID:22235121
• DHFR는 세포질, 미토콘드리아, 핵에 위치하여 여러 세포 구획에서 엽산 대사를 지원합니다.
• 이 효소는 태아 및 성인 조직에서 광범위하게 발현되며, 성인 뇌와 전혈에서 더 높은 수준으로 발현됩니다.
• 대체 스플라이싱에 의해 여러 이소형이 생성되며, DHFR의 돌연변이는 메토트렉세이트 내성 및 질병 변이와 관련이 있습니다.
• DHFR는 자신의 mRNA 및 DHFR2의 mRNA에 결합하여 전사 후 유전자 발현에서 잠재적인 조절 역할을 나타냅니다.
• 이 단백질은 유비퀴틴화를 거치며, 대규모 프로테오믹스 스크리닝에서 확인되었습니다.

실험 가이드 및 기술 팁

• 면역원은 전체 길이의 인간 DHFR(aa 1-187)을 포함하므로, 상동성이 높은 종(인간 및 마우스에서 확인됨)에서 자연 상태의 단백질과의 잠재적 반응성을 시사합니다. 귀하의 샘플 시스템에서 검증하십시오.
• 웨스턴 블롯의 경우, 약 21 kDa에서 밴드를 예상할 수 있습니다. 차단 및 검출 조건을 최적화하고 적절한 로딩 대조군을 포함하십시오.
• 면역형광/면역세포화학의 경우, 미토콘드리아 및 핵 DHFR 위치를 보존하는 고정 및 투과화 프로토콜을 고려하십시오.
• ELISA 수행 시, 재조합적으로 발현된 DHFR 또는 세포 용해물을 항원으로 사용할 수 있으며, 항체 역가 측정을 권장합니다.
• DHFR 발현은 조직 및 세포 주기 단계에 따라 다르므로, 실험에 관련된 양성 및 음성 대조군을 포함하십시오.
• 폴리클론 항체로서, 로트 간 일관성을 평가하고 특이성을 확인하기 위해 차단 펩타이드 사용을 고려하십시오.

CamelBio: 원스톱 소싱 브릿지

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