IF/ICC 및 ELISA용 디메틸-DNMT3A-K44 (O88508) 토끼 다클론 항체

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: DNA (시토신-5)-메틸트랜스퍼라제 3A (DNMT3A)의 기능과 국소화

• DNMT3A는 게놈 전체 de novo DNA 메틸화에 필요한 핵심 효소로, 발생 과정에서 메틸화 패턴을 설정하는 데 필수적입니다. 비진행적 방식으로 DNA를 변형하며 CpG 부위와 비CpG 부위 모두를 메틸화할 수 있습니다.
• 이 효소는 히스톤 변형과 협조하여 기능하며, 뉴클레오솜 사이의 링커 DNA를 우선적으로 메틸화하고 히스톤 H1에 의해 억제됩니다. 또한 생식 세포에서 대부분의 각인 유전자좌를 메틸화하는 등 부계 및 모계 각인에 역할을 합니다.
• DNMT3A는 전사 코리프레서로 작용하는데, 예를 들어 ZBTB18와 상호작용하여 HDAC 활성을 유도함으로써 전사를 억제할 수 있습니다. 또한 36번 라이신이 트리메틸화된 히스톤 H3(H3K36me3)로 표시된 게놈 영역에 모집됩니다.
• 세포 내에서 DNMT3A는 주로 핵에 위치하며 염색체와 결합하여 중심심 이형염색질 주요 위성 반복 부위에 축적됩니다. 또한 세포질에서도 발견될 수 있습니다.
• 두 가지 아이소폼이 존재합니다: 아이소폼 1은 모든 조직에서 낮은 수준으로 발현되는 반면, 아이소폼 2는 비장, 고환, 흉선과 같이 활발한 de novo 메틸화가 일어나는 조직에 제한적으로 발현됩니다.
• 이 단백질은 여러 번의 번역 후 변형을 받는데, 인산화(예: Ser102, Ser239, Ser251, Ser386, Ser389, Thr120, Thr257 부위), 메틸화(예: Arg167 부위의 오메가-N-메틸아르기닌) 및 Cys706 부위의 자가 메틸화가 포함됩니다.

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실험 가이드 및 기술 팁

• 면역원은 생쥐 DNMT3A의 44번 라이신이 디메틸화된 합성 펩타이드입니다. IF/ICC의 경우 이 변형은 상황에 따라 특이적일 수 있으므로, 메틸화 펩타이드와 비메틸화 펩타이드 차단을 비교하거나 녹아웃/녹다운 대조군을 사용하여 실험 시스템에서 유효성을 검증하십시오.
• ELISA 적용 시 면역화 펩타이드를 양성 대조군으로, 비변형 펩타이드를 음성 대조군으로 사용하여 디메틸 특이성을 확인하는 것이 좋습니다.
• 사람과 래트에 교차 반응성을 가지므로 이 항체는 종간 보존된 메틸화 부위 연구에 적합할 수 있으나, 실험에서 종 특이적 반응성을 확인하십시오.
• 최적 작업 희석 비율은 실험적으로 결정해야 하며, IF/ICC 및 ELISA의 일반적인 범위는 적용 분야에 따라 다르므로 최종 사용자가 최적화해야 합니다.

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