WB용 항-DNA 중합효소 에타(DNA polymerase eta) 다클론 항체 - Q9Y253

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: DNA 중합효소 에타의 기능 및 위치

• DNA 중합효소 에타(POLH, RAD30A 또는 XP-V 단백질이라고도 함)는 UV 유도 사이클로부탄 피리미딘 이량체 및 기타 변형된 손상을 가로질러 손상 복구 합성(TLS)을 전문으로 하는 Y-패밀리 DNA 중합효소입니다. 관련 참고 문헌: PMID:10385124, PMID:11743006, PMID:16357261
• POLZ 복합체(REV3L-REV7-POLD2-POLD3)와 협력하여 손상 부위를 우회한 후 프라이머를 연장하며, 손상된 부위 반대편에 하나 또는 두 개의 뉴클레오타이드를 삽입합니다. 관련 참고 문헌: PMID:24449906
• POLH는 DNA 중합효소 이오타(POLI)를 복제 초점으로 표적화하여 조율된 손상 반응을 촉진합니다. 관련 참고 문헌: PMID:12606586
• 염기 제거 복구 중, POLH는 5′-데옥시리보스 인산과 쉬프 염기(Schiff base)를 형성하여 효소를 공유 결합으로 가두고 DNA 합성을 억제함으로써 돌연변이를 방지합니다. 관련 참고 문헌: PMID:14630940
• 이 단백질은 핵에 위치하며 DNA 손상 시 복제 초점에 농축됩니다.
• POLH는 유비퀴틴화의 대상이 되며, 이소펩타이드 결합을 형성하여 모집 및 활성을 조절합니다.
• POLH의 돌연변이는 극심한 UV 민감성과 높은 피부암 위험을 특징으로 하는 열성 질환인 색소성 건피증 변이형(XP-V)의 원인이 됩니다.
• 또한 면역글로불린 유전자의 체세포 과돌연변이(somatic hypermutation)에 관여하여 항체 다양성에 기여합니다. 관련 참고 문헌: PMID:11376341, PMID:14734526

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원은 중합효소 활성과 손상 우회에 중요한 보존 도메인을 포함하는 인간 POLH의 중심 영역(aa 322–520)에 해당합니다.
• 웨스턴 블롯(WB)의 경우, 인간, 마우스 또는 쥐 세포주에서 추출한 핵 용해물에서 약 78 kDa의 특정 밴드를 예상할 수 있습니다.
• 면역형광(IF/ICC)의 경우, UV 처리 후 증가하는 핵 초점을 감지하기 위해 고정 및 투과화 과정을 최적화하십시오.
• ELISA의 경우, 면역원 단백질을 미리 코팅하거나 직접 코팅 방식을 사용하고, 배경 노이즈를 최소화하기 위해 차단(blocking) 단계를 고려하십시오.
• 녹아웃(knockout) 또는 siRNA 처리 샘플에서 항체 특이성을 검증하여 표적 인식을 확인하십시오.

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