WB, ELISA용 DNA 폴리머라제 감마 단일클론 항체 - P54098

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: DNA 폴리머라제 감마 기능 및 국재화

• DNA 폴리머라제 서브유닛 감마-1(POLG)은 미토콘드리아 DNA 폴리머라제의 촉매 코어로, 전체 미토콘드리아 게놈의 복제를 담당합니다. 이 효소는 단일 가닥 DNA 주형과 RNA 프라이머를 사용하여 중쇄와 경쇄를 모두 합성하며, TWNK 헬리카제 및 SSBP1과 함께 고도로 연속적인 복제체(replisome)로 기능합니다. 관련 참고문헌: PMID:11477093, PMID:11897778, PMID:15917273
• POLG는 염기 치환, 단일 염기 추가 및 결실을 교정하는 3'→5' 엑소뉴클레이스 교정 활성을 possessed하여 mtDNA 복제 중 높은 정확도를 보장합니다. 잘못된 삽입이 발생하면 효소는 핵분해 편집 모드로 전환되어 잘못된 뉴클레오타이드를 제거합니다. 관련 참고문헌: PMID:10827171, PMID:11477094, PMID:11504725
• mtDNA 합성을 완료한 후 POLG는 적절한 결합을 촉진하기 위해 닉(nick)에서 3'→5' 엑소뉴클레이스 분해를 매개하며, 5'-디옥시리보스 인산(dRP) 리아제 활성도 나타내어 미토콘드리아 염기 절제 복구 경로에 참여할 수 있게 합니다. 관련 참고문헌: PMID:9770471, PMID:11477093, PMID:15167897
• POLG 유전자의 돌연변은 진행성 안외근마비(PEO), 신경병증, 간질, 및 리 증후군을 포함한 광범위한 미토콘드리아 장애와 연결되어 있습니다. 이는 미토콘드리아 DNA 고갈 및 결실 증후군과 관련된 주요 미토콘드리아 질환 유전자입니다.
• 이 단백질은 미토콘드리아 기질에 국재하며 미토콘드리아 뉴클레오이드의 구성 요소로, mtDNA와 결합하여 복제 및 유지 관리를 용이하게 합니다.
• POLG는 DNA 폴리머라제 A형 패밀리에 속하는 크고 다기능적인 효소(약 140 kDa)입니다. 폴리머라제 및 엑소뉴클레이스 활성을 위해 마그네슘 이온을 필요로 합니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 이 항체를 생성하는 데 사용된 면역원은 인간 POLG의 C-말단 영역(아미노산 1140~1239) 내의 펩타이드에 해당합니다. 이 에피토프는 촉매 도메인 외부에 위치하므로 야생형 및 일부 돌연변이 형태 모두를 인식할 수 있습니다. 그러나 각 실험 시스템에 대해 네이티브 및 변성 조건에서 에피토프 접근성을 확인해야 합니다.
• 웨스턴 블롯의 경우 예상 분자량은 140 kDa입니다. 고분자량 단백질에 적합한 젤 농도와 전달 조건을 사용하고, 인간 또는 마우스 세포의 미토콘드리아 용해물과 같은 양성 대조군을 포함하십시오.
• 마우스 POLG와의 교차 반응성이 확인되어 미토콘드리아 질환 마우스 모델 연구에 이 항체를 적합하게 만듭니다. 높은 염기 서열 보존성으로 인해 다른 종과의 교차 반응성도 가능하지만 실험적으로 검증되어야 합니다.
• ELISA의 경우 이 항체는 포획 또는 검출 시약으로 사용할 수 있습니다. 최적 작업 농도를 결정하기 위해 항체를 적정(titrate)하고, 코팅 항원이 C-말단 에피토프 또는 면역원 영역을 포괄하는 재조합 POLG 단편을 포함하는지 확인하십시오.
• POLG 발현은 전신적이지만 높은 에너지 요구량이 있는 조직에서 풍부하다는 점에 유의하십시오. 간, 근육 또는 뇌 미토콘드리아 조제물과 같은 관련 샘플 시스템에서 검출 감도를 검증하는 것이 좋습니다.

CamelBio: 원스톱 소싱 파트너

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