WB, IHC-P, ELISA용 anti-eIF2C3 단일클론 항체 - Q9H9G7

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: eIF2C3/Argonaute-3 기능 및 국재화

• eIF2C3는 Argonaute-3 (Ago3) 또는 진구진화 번역 개시 인자 2C 3로도 알려져 있으며, 전사 후 유자 침묵에 관여하는 RNA 유도 침묵 복합체(RISC)의 핵심 구성 요소입니다.
• miRNA와 같은 짧은 RNA에 결합하여 상보적 mRNA의 번역을 억제합니다. 줄기세포에서는 Alu 반복 서열에서 유래한 siRNA를 안정화하고 EDC4를 통해 mRNA 디캡핑 복합체를 모집하여 일부 코딩 mRNA의 분해를 촉진하는 것으로 제안되었습니다.
• eIF2C3는 RNA 슬라이서(엔도뉴클레아제) 활성을 가지지만 매우 선택적이며, 가이드-타겟 상보성 영역에 대해 특정 5' 및 3' 인접 서열이 있는 RNA만 절단합니다 (PubMed:29040713). 관련 참고문헌: PMID:29040713
• 이 단백질은 세포질에 국재하며 mRNA 저장 및 분해에 관여하는 세포질 과립(granule)인 P-bodies에 집중되어 있습니다.
• eIF2C3는 아세틸화, 인산화 및 유비쿠틴 유사 접합을 포함한 번역 후 변형을 거치며, 이는 안정성과 활성을 조절할 수 있습니다.
• AGO3 유전자는 대안 스플라이싱을 거쳐 서로 다른 기능이나 발현 패턴을 가질 수 있는 여러 이소형을 생성합니다.
• 여러 기능적 키워드로 분류됩니다: RNA 결합 단백질, 엔도뉴클레아제, 가수분해효소, 금속 결합 단백질 및 리보뉴클레오프로틴으로, RNA 침묵에서의 촉매 및 구조적 역할을 강조합니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 사람 eIF2C3의 C-말단 영역(아미노산 721-860)에 해당하며, 이는 PIWI 도메인의 일부입니다. 이 도메인은 엔도뉴클레아제 활성과 가이드 RNA 결합에 중요합니다. 연구자는 실험 조건에서 에피토프에 접근할 수 있는지 확인해야 합니다.
• 웨스턴 블로팅(WB)의 경우 약 97 kDa에서 밴드가 나타나는 것을 기대하십시오. 적절한 용해 및 환원 조건으로 시료 준비를 최적화하고, 특이성을 검증하기 위해 양성 대조군(예: HeLa)과 음성 대조군(예: 녹아웃)을 모두 포함하십시오.
• 면역조직화학(IHC-P)의 경우 표준 항원 회수 방법(예: 시트르산 버퍼, pH 6.0)을 고려하고, 알려진 eIF2C3 발현 패턴과 비교하거나 siRNA 처리된 조직 섹션을 사용하여 염색을 검증하십시오.
• ELISA 응용의 경우 재조합 단백질 또는 펩타이드의 적절한 코팅을 보장하고, 최적의 감도와 특이성을 결정하기 위해 다양한 항체 농도에서 테스트하십시오.

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