IHC-P, ELISA용 Anti-EP300 폴리클로널 항체 - Q09472

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: 히스톤 아세틸트랜스퍼라제 p300 기능 및 국소화

• 히스톤 아세틸트랜스퍼라제 p300 (E1A 관련 단백질 p300, KAT3B라고도 함)은 EP300 유전자에 의해 암호화된 큰 (~264 kDa) 전사 코액티베이터입니다. 이는 크로마틴 구조와 유전자 발현을 조절하는 아세틸트랜스퍼라제의 p300/CBP 팩밀리에 속합니다.
• p300은 히스톤 아세틸트랜스퍼라제로 작용하여 뉴클레오솜의 4가지 핵심 히스톤(H2A, H2B, H3, H4)을 아세틸화합니다. 이러한 히스톤 아세틸화는 전사 활성화를 위한 후성유전학적 태그로 작용하며, 활성 크로마틴과 관련된 히스톤 H3 및 H4에 이중 아세틸-메틸 마크(Kacme)를 생성할 수도 있습니다. 관련 참고문헌: PMID:23415232 PMID:23934153 PMID:8945521 PMID:21131905 PMID:23911289 PMID:37731000
• 히스톤 외에도 p300은 전사 인자(예: p53/TP53, ALX1, FOXO1, STAT3) 및 기타 조절 인자(예: HDAC1, SIRT2)를 포함한 수많은 비히스톤 단백질을 아세틸화하여 그 안정성, DNA 결합 또는 효소 활성을 조절합니다. 또한 히스톤 H1과 PCNA를 아세틸화하여 DNA 손상 반응에 참여합니다. 관련 참고문헌: PMID:11511361 PMID:15448695 PMID:15653507 PMID:12912931 PMID:18722353
• p300은 다양한 아실-CoA 기질을 사용하여 히스톤 크로토닐화, 부티릴화, 2-하이드록시이소부티릴화, 락틸화, 프로피오닐화 및 이소니코티닐화를 촉매하는 다재다능한 아실트랜스퍼라제 활성을 나타내며, 이는 대사와 크로마틴 상태를 연결합니다. 관련 참고문헌: PMID:17267393 PMID:25818647 PMID:29775581 PMID:31645732
• 세포 내 국소화에는 핵, 세포질 및 염색체가 포함됩니다. 핵 내 p300은 특정 전사 인자에 의해 프로모터로 모집되며 CLOCK/BMAL1과의 상호작용을 통해 생체 리듬 조절에 관여합니다. 관련 참고문헌: PMID:14645221
• p300은 아세틸화, 인산화, 메틸화, 시트룰화 및 유비퀴틴화를 포함한 다양한 번역 후 수정의 기질이 되며, 이는 그 활성과 상호작용을 미세 조정합니다. 그 브로모도메인은 아세틸화된 리신을 인식하고 단백질은 아연 집기 모티프를 포함합니다.
• 바이러스 병인학에서 p300은 전 바이러스 전사를 촉진하기 위해 HIV-1 Tat 단백질에 의해 납치되며, 아데노바이러스 E1A와 상호작용하여 세포 전환과 연결됩니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 아미노산 940-1030에 걸쳐 있는 재조합 단백질로, 이 영역은 촉매 HAT 도메인이나 기타 기능적 영역의 일부를 포함할 수 있습니다. 이 설계는 전장 p300을 검출하고 고도로 상동성인 CBP와 구별하는 데 적합할 수 있습니다. 녹아웃 또는 녹다운 모델을 사용하여 특이성을 확인하십시오.
• 공급업체 기준 권장 응용 분야는 IHC-P 및 ELISA입니다. 면역조직화학의 경우 항원 회수 조건을 고려하고 핵 및 세포질 염색 패턴에 대해 항체 농도를 최적화하십시오. ELISA의 경우 표준으로 재조합 p300 단백질로 검증하십시오.
• 크기가 크기 때문에(264 kDa), 웨스턴 블로트를 시도하는 경우 적절한 겔 전기영동(예: 6-8% SDS-PAGE)과 긴 전달 시간을 사용하십시오.
• 공급업체 데이터에 따르면 마우스 및 쥐 p300과 교차 반응하므로 설치류 모델에서 사용할 수 있습니다. 그러나 사용하는 특정 조직/세포주와의 반응성을 확인하십시오.

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