WB, IF/ICC, ELISA용 Anti-EPHA4 폴리클로날 항체 - P54764

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: EPHA4 기능 및 국소화

• 에프린 타입-A 수용체 4 (EPHA4, EK8, SEK, HEK8, TYRO1로도 알려짐)는 EPHA4 유전자에 의해 암호화되는 수용체 티로신 키나제인 Eph 수용체 패밀리의 구성원입니다.
• EPHA4는 인접 세포의 막에 고정된 에프린 리간드에 결합하여 쌍방향 신호 전달(수용체를 통한 정방향 및 리간드를 통한 역방향)을 시작합니다. 이는 GPI 연결 에프린-A 리간드(예: EFNA1)와 막통과 에프린-B 리간드(예: EFNB3) 모두에 의해 활성화되는 독특한 비특이성(promiscuous)을 가집니다.
• 발달 중인 신경계에서 EPHA4는 피질척수 돌기(corticospinal projections)의 형성을 포함한 축색 유도에 중요한 역할을 하며, 신경근 회로 형성 중 운동 및 감각 축색을 분리합니다.
• 발달 이후에도 EPHA4는 성인 뇌에서 시냅스 가소성을 조절하고 손상 후 축색 재생을 억제합니다. 또한 중추 신경계 혈관 형성에 기여합니다.
• 세포 내에서 EPHA4는 세포막, 축색 및 수상돌기 돌기, 시냅스 후 밀도 막, 초기 엔도솜, 그리고 접합 부착(adherens junctions)에 국재합니다.
• EPHA4는 조직 전반에 걸쳐 발현되며 흉상 상피 발달 및 와우 기둥 세포 분리와 같은 다양한 세포 간 신호 전달 이벤트에 참여합니다. CAPRIN1을 인산화하여 막이 없는 구획 형성을 촉진할 수 있습니다(유사성에 의함).

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 N-말단 세포 외 도메인(aa 20-100)에 걸쳐 있으므로, 이 항체는 전장 수용체를 인식할 것으로 예상되며 가용성 단편이나 절단된 세포 외 도메인을 검출할 수 있습니다.
• 환원 조건을 사용하는 WB에서는 사람, 생쥐 또는 쥐 조직/세포주의 용해물에서 ~110 kDa에서 이동하는 밴드를 예상하십시오. 특이성 검증을 위해 적절한 양성 및 음성 대조군을 실행하십시오.
• IF/ICC의 경우 EPHA4는 일반적으로 원질막 및 신경 세포 돌기 염색을 나타냅니다. 에피토프 접근성과 형태를 보존하기 위해 최적화된 고정(예: 4% PFA) 및 투과화 처리를 사용하십시오.
• ELISA 응용에서 세포 외 에피토프 인식은 샌드위치 분석 또는 리간드 결합 경쟁 연구에 활용될 수 있습니다. 가능한 경우 재조합 EPHA4 단백질로 분석을 검증하십시오.
• EPHA4는 매우 보존되어 있으므로 다른 Eph 수용체와의 교차 반응성을 배제할 수 없습니다. 검출된 밴드의 정체성은 가능한 경우 siRNA 녹다운(knockdown) 또는 KO 모델로 확인해야 합니다.

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