웨스턴 블롯, ELISA용 Anti-EPS8 폴리클로날 항체 - Q12929

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: EPS8 기능 및 위치

• EPS8(Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8)는 액틴 세포골격 역학을 조절하여 세포 이동 및 수지상 세포 기능과 같은 과정을 제어하는 신호 전달 어댑터 단백질입니다. 이는 처음에 EGF 수용체 키나아제의 기질로 확인되었습니다.
• 이 단백질은 SOS1 및 ABI1과 함께 삼량체 복합체의 일부로 작용하여 Rac-특이적 GEF 활성을 활성화함으로써 Ras에서 Rac으로 신호를 전달하여 성장 인자 신호 전달을 액틴 재구성과 연결합니다.
• EPS8는 이중 액틴 조절 활성을 나타냅니다: ABI1에 결합 시 뾰족한 말단 뚜껑 형성(운동성 억제) 및 BAIAP2와 연관 시 액틴 다발 형성으로 필로포디아 연장 및 막 돌출을 촉진합니다.
• 뉴런에서 EPS8는 액틴 뚜껑 형성을 통해 축삭 필로포디아 형성을 부정적으로 조절합니다. 그러나 BDNF에 의해 유도된 인산화는 이 뚜껑 형성 활성을 억제하여 필로포디아 성장을 가능하게 합니다.
• 유모 세포의 스테레오실리아 끝에서 EPS8는 WHRN 및 MYO15A와 복합체를 형성하며, 이는 액틴 코어의 신장에 필수적입니다. EPS8의 돌연변이는 비증후군성 난청(DFNB102)과 관련이 있습니다.
• 세포 내에서, 세포 피질, 러플, 성장 원뿔, 스테레오실리아 및 시냅토솜에 위치하며, 이는 역동적인 액틴 주도 막 돌출에서의 역할과 일치합니다.
• 이 단백질은 SH3 도메인을 포함하며 인산화 및 유비퀴틴화를 겪습니다. 유비퀴틴 매개 분해는 세포 주기 진행과 관련된 세포 형태 변화를 위해 G2기 동안 필요합니다.
• 뇌, 심장, 폐, 간, 신장 및 췌장을 포함한 조직 전반과 많은 상피 및 섬유아세포 계통에서 널리 발현됩니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원은 인간 EPS8의 N-말단 영역(aa 1-200)에 해당하며, 여기에는 SH3 도메인의 일부와 N-말단 영역이 포함됩니다. 이 영역은 인간, 마우스 및 래트에서 상대적으로 보존되어 있어 교차 반응성을 설명합니다. 다른 종으로 작업하는 경우 서열 정렬을 고려하십시오.
• 웨스턴 블롯의 경우 예측된 분자량은 ~92 kDa입니다(UniProt 기준: 91.9 kDa). 이 크기 근처에서 밴드가 관찰될 수 있습니다. 그러나 인산화 또는 기타 변형으로 인해 약간의 이동이 발생할 수 있습니다. 적절한 양성 및 음성 대조군으로 검증하십시오.
• ELISA 적용 시, 잘 특성화된 재조합 EPS8 단백질 또는 알려진 발현을 가진 계통의 세포 용해물을 사용하십시오. EPS8는 널리 발현되므로 중간에서 높은 발현 수준을 가진 시스템을 선택하십시오.
• 폴리클로날 항체로서, 로트 간 일관성은 다를 수 있습니다. 특히 정량 분석의 경우 로트를 변경할 때 파일럿 실험을 수행하는 것을 고려하십시오.

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