WB, IF-P, IHC-P, ELISA용 항-Granzyme B 폴리클로날 항체 - P10144

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: Granzyme B 기능 및 국소화

• Granzyme B는 C11, CTLA-1, Cathepsin G-like 1 (CTSGL1), Fragmentin-2 및 HLP로도 알려져 있으며, 인간의 GZMB 유전자에 의해 암호화된 세린 프로테아제입니다. 이는 세포독성 T세포 및 NK 세포 과립의 핵심 구성 요소입니다.
• 이 프로테아제는 아스파르트산 잔기 뒤를 특이적으로 절단하며, 이는 카스파제와 공유하는 기질 특성으로 인해 다중 하류 사망 경로를 활성화할 수 있습니다. 관련 참고문헌: PMID:1985927, PMID:8258716
• 면역 시냅스를 통해 표적 세포로 전달되면, Granzyme B는 가스더민-E(GSDME)를 직접 절단하여 그 공포 형성 도메인을 방출시키고, 이는 고도의 염증성 프로그램된 세포 사멸 형태인 파이로프토시스를 유발합니다. 관련 참고문헌: PMID:31953257, PMID:32188940
• Granzyme B는 또한 프로테아제 분해를 통해 카스파제-3, -9 및 -10을 활성화하여, 과립 외분비 매개 세포독성을 고전적인 세포자멸사 실행과 연결합니다. 관련 참고문헌: PMID:9852092
• 세균 감염의 경우, Granzyme B는 카스파제-7(CASP7)을 절단하고 활성화하여 세포막 복구를 촉진할 수 있으며, 이 기능은 서열 유사성으로부터 추론되었습니다.
• 세포 내적으로 Granzyme B는 세포용해 과립에 저장되었다가 분비되며, N-말단 신호 펩타이드를 포함하고 완전한 단백질 분해 활성을 얻기 전에 지모겐(zymogen) 활성화를 거칩니다.
• 번역 후 변형에는 N-결합 당화 및 이황화 결합 형성이 포함되며, 둘 다 적절한 폴딩, 운송 및 안정성에 필수적입니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 인간 Granzyme B 잔기 100–200에 해당하는 합성 펩타이드입니다. 이는 선형 에피토프를 인식하는 항체를 생성할 가능성이 높으므로 WB와 같은 변성 응용에 적합합니다.
• WB의 경우, 환원 조건에서 약 28kDa의 주요 밴드 검출을 확인하는 것이 좋으며, 이는 지모겐 또는 성숙 Granzyme B에 해당합니다. 처리 중간체는 더 낮은 분자량에서 나타날 수 있습니다.
• 마우스 Granzyme B와의 교차 반응성으로 인해 이 항체는 마우스 조직 또는 세포 모델에 사용할 수 있지만, 사용자는 자신의 실험 시스템에서 종 특이적 성능을 검증해야 합니다.
• IHC-P 및 IF-P의 경우, 펩타이드 에피토프는 고정 및 포매 조건에 민감할 수 있으므로 항원 회수 및 항체 희석을 최적화하십시오.
• ELISA의 경우, 직접 결합 또는 샌드위치 방식에는 예비 페어링 테스트가 필요할 수 있습니다. 폴리클로날 특성으로 인해 신호 증폭을 제공할 수 있지만, 적절히 적정하지 않으면 배경 증가를 초래할 수 있습니다.

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