WB, IF/ICC, ELISA용 Anti-GRASP65 폴리클로날 항체 - Q9BQQ3

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: GRASP65 (GORASP1) 기능 및 국재화

• GRASP65 (GORASP1, GOLPH5)는 GORASP 패밀리에 속하는 골지체(Golgi apparatus)의 핵심 구조 단백질입니다. 대안 스플라이싱을 통해 여러 이소폼이 생성됩니다. (키워드: 대안 스플라이싱)
• 골지 리본의 형성과 유지에 필요하며, GORASP2/GRASP55와 함께 작용합니다. 또한 골지체 소낭(cisternae)의 조립 및 막 적층, 그리고 유사분열 후 분해된 골지체 스택의 재조립에 역할을 합니다.
  관련 문헌:
  PMID:33301566
• 세포자멸사 동안 골지체 단편화를 위해서는 카스파제(Caspase) 매개 GRASP65 절단이 필요합니다. (유사성에 의함)
• GRASP65는 GOLGA2/GM130과의 상호작용을 통해 운반 소포가 골지체 막에 도킹하는 것을 매개합니다.
  관련 문헌:
  PMID:16489344
• 소포체(ER) 스트레스 유발 코어-글리코실화 CFTR의 세포막으로의 비전형적 트래피킹(unconventional trafficking)을 촉진합니다.
  관련 문헌:
  PMID:21884936
• 세포 내적으로 GRASP65는 골지체, 특히 시스-골지 네트워크 막(cis-Golgi network membrane)과 소포체-골지 중간 구획 막(ER-Golgi intermediate compartment membrane)에 국재화합니다.
• 번역 후 변형으로는 인산화, 미리스토일화(myristoylation), 아연 결합이 포함됩니다. 이 단백질은 인산단백질, 지질단백질 및 금속 결합 단백질입니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 인간 GRASP65의 아미노산 221~440에 해당하며, 이는 C-말단 영역에 위치합니다. 이소폼 인식을 예측할 때 이 도메인에 영향을 미칠 수 있는 스플라이스 변이체를 고려하십시오.
• 웨스턴 블로팅(WB)의 경우 인간 세포주에서 항체를 검증하십시오. 내인성 GRASP65는 약 46 kDa에서 이동합니다. 세포자멸사 동안 절단 파편이 나타날 수 있으므로 적절한 대조군(예: 스타우로스포린(staurosporine) 처리된 세포)을 사용하십시오.
• 면역형광/면역세포화학(IF/ICC)의 경우, 선명한 골지체 염색을 얻기 위해 고정(예: 메탄올 또는 파라포름알데히드) 및 투과화 과정을 최적화하십시오. 골지체 마커(예: GM130)와의 이중 염색을 권장합니다.
• ELISA의 경우 이 항체는 포획 또는 검출 시약으로 사용할 수 있습니다. 분석 시스템에 최적인 농도를 결정하기 위해 적정(titration)을 수행하십시오.

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