Anti-HIF1AN/FIH1 Rabbit Polyclonal Antibody for WB and ELISA - Q9NWT6

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: HIF1AN/FIH1 기능 및 위치

• HIF1AN(저산소 유도 인자 1-알파 억제제), 또는 FIH-1(Factor Inhibiting HIF-1)로도 불리며, 저산소 반응을 조절하는 아스파라진 하이드록실화효소임.
• 정상 산소 조건에서, C-말단 전사활성화 도메인의 Asn-803에서 HIF-1α를 하이드록실화하여 p300/CBP 공활성제의 모집을 차단함으로써 저산소 유도 유전자 전사를 억제함.
• 직접적인 산소 센서로 작용함; 그 하이드록실화 효소 활성은 분자 산소, 철, 2-옥소글루타르산이 필요하여 세포 산소 농도를 HIF-1α 안정성 및 활성과 연결함.
• HIF-1α를 넘어서, HIF1AN은 NFKB1, NOTCH1, ASB4, TNKS2 등 다양한 단백질의 앙키린 반복 도메인(ARD) 내 아스파라진, 아스파르트산, 히스티딘 잔기를 하이드록실화하여 저산소 이상의 신호전달 경로를 조절함.
• NOTCH1을 하이드록실화하여 근육 분화를 가속화함으로써 Notch 신호전달을 부정적으로 조절함; 반대로, ASB4의 하이드록실화는 혈관 분화를 긍정적으로 촉진함.
• 세포 내 분포는 핵과 세포질 모두를 포함하며, 핵 주변에 축적되어 전사 조절 및 세포질 단백질 상호작용에서의 역할을 반영함.
• 이산소화효소 및 철 의존성 산화환원효소로 분류됨; 활성 부위는 촉매 작용에 필수적인 단일 철 중심을 포함함.

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원은 촉매 JmjC 도메인을 포함하는 거의 전체 HIF1AN 단백질(잔기 1–349)을 포괄함; 이 설계는 변성 및 비변성 분석에서 검출을 돕는 여러 에피토프를 인식하는 항체를 생성할 것으로 예상됨.
• Western blot의 경우, 약 40–41 kDa 근처의 밴드가 예상됨; 정상 산소 조건 세포 용해물(예: HeLa, HEK293)을 양성 대조군으로 포함시키고, HIF-1α 하이드록실화 의존적 효과를 평가하기 위해 저산소 처리 샘플을 포함시키는 것이 유익할 수 있음.
• ELISA 수행 시, 재조합 HIF1AN 또는 HIF-1α 펩타이드로 코팅하는 것을 고려하십시오; 별개의 에피토프에 특이적인 포획 항체와 짝을 이루는 샌드위치 ELISA는 특이성을 높일 수 있음.
• 마우스 HIF1AN과의 예상 교차 반응성이 지지되지만, 적절한 조직 또는 세포 추출물을 사용하여 성능을 확인해야 함.
• 최적의 항체 희석 및 분석 조건은 각 실험 시스템에 대해 경험적으로 결정되어야 함.

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