WB, IHC-P, ELISA용 항-HLA 클래스 1 ABC 다클론 항체 - P04439 / P01889 / P10321

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: HLA 클래스 1 ABC의 기능과 위치

• HLA 클래스 I 알파 사슬(HLA-A, -B, -C)은 고전적인 주조직적합성 복합체 클래스 I(MHCI) 분자의 중쇄를 구성합니다. 베타-2 미세글로불린(B2M)과 비공유 결합으로 결합하여 세포 표면에 세포내에서 가공된 펩티드를 제시함으로써 면역 감시를 수행합니다.
• B2M과 복합체를 형성한 HLA 클래스 I 분자는 주로 바이러스 및 종양 유래 펩티드(8-13개 잔기)를 CD8+ T 세포의 알파-베타 T 세포 수용체(TCR)에 제시하여, 항원 특이적 세포독성 T 세포 반응을 유도하여 감염되거나 형질전환된 세포를 제거합니다. 관련 참고문헌: PMID:10449296, PMID:12138174, PMID:12393434
• 또한 HLA 클래스 I 분자는 분비 또는 막 단백질의 신호 서열에서 유래한 자가 펩티드를 제시하여 T 세포 관용을 유도하고 자가면역을 예방하는 데 기여합니다. 관련 참고문헌: PMID:25880248, PMID:7506728, PMID:7679507
• 고도로 다형적인 HLA 대립유전자는 펩티드 결합 모티프를 결정합니다; 예를 들어, 인간 집단에서 가장 흔한 대립유전자인 HLA-A*02:01은 IAV 매트릭스 단백질(GILGFVFTL) 및 HIV-1 gag-pol(ILKEPVHGV)과 같은 면역우성 바이러스 에피토프를 제시하며, 2번 위치와 C말단에 소수성 앵커가 특징입니다.
• HLA 클래스 I 분자는 세포막과 소포체 막에 국재되는 통합 막 당단백질로, 이 위치에서 펩티드 적재와 품질 관리가 이루어집니다.
• 번역 후 변형에는 당화, 이황화결합 형성, 인산화 및 유비퀴틴화가 포함되며, 이는 안정성, 이동 및 면역 인식을 조절합니다.
• 거의 모든 유핵 세포에서 편재적으로 발현되는 HLA 클래스 I 분자는 면역계 항상성과 자가/비자가 식별에 필수적입니다.
• 이 제품의 항체는 HLA-A, HLA-B 및 HLA-C에 공통적인 보존된 N말단 영역(aa 1-100)을 표적으로 하므로, 고전적인 MHC 클래스 I 분자를 넓게 인식할 수 있습니다.

실험 가이드 및 기술 팁

• 면역원 설계: 면역원은 인간 HLA-A, -B 및 -C의 아미노산 1-100을 포함하는 합성 펩티드에 해당합니다(NP_001229687.1 기준). 이 N말단 영역은 세포외 펩티드 결합 도메인을 포함하므로 3가지 고전적인 MHC 클래스 I 분자 모두에 대한 반응성이 보장됩니다. 특정 대립유전자 판별이 필요한 경우 대립유전자 특이적 항체 사용을 고려하십시오.
• 웨스턴 블로팅(WB): 환원 조건에서 약 40 kDa 부근에 밴드가 예상됩니다. HLA 발현 프로필이 알려진 적절한 인간 세포 용해물(예: 림프구, 종양 세포주)에서 검증을 수행하십시오.
• 면역조직화학(IHC-P): 표적이 막단백질이기 때문에, 시트레이트 완충액(pH 6.0)에서 열유도 에피토프 회수(HIER)를 이용한 항원 회수가 검출 감도를 향상시킬 수 있습니다. 양성(예: 편도선, 비장) 및 음성 대조 조직을 사용하여 항체 희석비를 최적화하십시오.
• ELISA: 직접 또는 샌드위치 ELISA에 적합합니다; 베타-2 미세글로불린 또는 특정 HLA 대립유전자를 인식하는 검출 항체와 짝을 이루어 사용하십시오. 재조합 HLA 단백질 또는 천연 MHC 클래스 I 복합체로 검증을 수행하십시오.

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