Anti-HLA-DPB1 토끼 단일클론 항체 (WB, IF-P, IHC-P, ELISA용) - P04440

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: HLA-DPB1 기능 및 국소화

• HLA-DPB1은 HLA class II 조직 적합성 항원의 베타 사슬로, CD4+ T 세포에 외인성 펩타이드 항원을 제시함으로써 적응성 면역 반응에서 중심적인 역할을 하는 이량체 막통과 당단백질입니다. 가공된 펩타이드(일반적으로 10~30개 잔기)는 엔도솜/리솜 시스템 내에서 MHC class II 분자에 로딩됩니다.
• 기능적 MHC class II 분자는 불변 사슬(CD74) 삼중체와 결합된 3개의 알파-베타 이량체로 구성된 이량체로 조립됩니다. 엔도솜 경로로 들어가면 CD74는 카텝신 S(CTSS) 및 카텝신 L(CTSL)과 같은 단백질 분해 효소에 의해 점진적으로 절단되어 결합 홈에 잔여 CLIP 펩타이드를 남기며, 이는 펩타이드 에디터인 HLA-DM의 도움을 받아 고친화도 항원성 펩타이드로 교환됩니다.
• 항원 로딩 과정은 특수화된 후기 엔도솜/리솜 구획에서 일어나며, 여기서 산성 미세 환경은 내재화된 항원의 단백질 분해와 펩타이드 교환 반응을 촉진합니다. B 세포에서는 이 과정이 HLA-DM의 활성을 조절하는 HLA-DO에 의해 추가로 조절됩니다.
• HLA-DPB1은 MHC class II 베타 사슬 유전자 군의 일원이며 제 6번 염색체의 HLA-DP 좌위에 매핑됩니다. 대체 이름으로는 DPB1, HLA-DP, HLA-DPB, HLA-DP1B가 있습니다.
• 세포 내적으로 HLA-DPB1은 세포 표면에 도달하기 전에 소포체(ER)와 골지체를 통과하여 이동합니다. 또한 엔도솜, 리솜, 및 트랜스-골지 네트워크에서도 검출되며, 이는 펩타이드 로딩 및 표면 발현 중 역동적인 세포 내 라우팅을 반영합니다.
• 이 단백질은 신호 펩타이드, 단일 막통과 나선, 이황화 결합을 포함하는 막통과 당단백질로 분류됩니다. N-연결 당화를 거치며 면역글로불린 슈퍼패밀리의 일원입니다.
• HLA-DPB1을 포함한 MHC class II 분자는 수지상세포, B 세포, 대식세포와 같은 전문 항원 제시 세포에 구성적으로 발현되지만, 점막 면역에 참여하는 장 상피세포를 포함한 다른 세포 유형에서도 유도될 수 있습니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 이 항체를 생성하는 데 사용된 면역원은 인간 HLA-DPB1의 잔기 1~100에 해당하는 합성 펩타이드로, N-말단 세포 외 영역에 해당합니다. 이 영역은 신호 펩타이드와 펩타이드 결합 및 MHC II 이량체 형성에 관여하는 β1 도메인의 일부를 포함합니다. 특정 응용에 대해 원형 상태와 변성 상태에서의 에피토프 접근성을 검증해 보십시오.
• 웨스턴 블로팅의 경우, 환원 조건에서 약 29 kDa에서 이동하는 밴드가 예상됩니다. 당화 및 단백질 복합체 형성으로 인해 더 높은 분자량 종도 관찰될 수 있습니다. 복잡한 용해물에서 비특이적 결합을 최소화하기 위해 차단 및 세척 조건을 최적화하십시오.
• 면역형광법(IF-P) 및 면역조직화학(IHC-P)에서 항체는 막 관련 항원을 표적으로 합니다. 포르말린 고정 파라핀 포함 조직의 경우 열 매개 시트르산 버퍼(pH 6.0)를 사용한 항원 회복이 종종 유익합니다. HLA-DPB1이 고발현되는 편도나 림프절과 같은 조직 특이적 양성 대조군 및 적절한 아이소타입 대조군을 포함하십시오.
• 이 항체는 마우스 및 쥐와 교차 반응성을 나타내며, 보존된 에피토프를 인식함을 시사합니다. 설치류 샘플을 사용할 때는 MHC class II 세포 유형 분포 및 발현 수준의 잠재적 차이를 고려하십시오. 모델 시스템에서의 적합성을 확인하기 위해 파일럿 실험을 권장합니다.
• ELISA 응용의 경우, 이 항체는 재조합 또는 천연 HLA-DPB1에 대해 포획 또는 검출 시약으로 사용할 수 있습니다. 항-HLA-DP 알파 사슬항체와 페어링하면 완전한 이량체 검출을 보장하는 데 도움이 될 수 있습니다. 용해성 HLA 또는 교차 반응성 MHC class I 분자의 간섭을 배제하기 위해 관련 샘플 매트릭스에서 검정을 검증하십시오.

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