WB, IF/ICC, ELISA용 Anti-HLA-DR 토끼 단일클론 항체 - P01903

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: HLA-DR 기능 및 국소화

• HLA-DRA 유전자는 HLA class II 조직 적합 항원 DR의 알파 체인을 암호화하며, 이는 베타 체인(HLA-DRB)과 짝을 이루어 항원 제시 세포에 기능적 MHC class II 분자를 형성합니다.
• MHCII 복합체는 세포외 항원 펩타이드(일반적으로 10-30개 아미노산)를 CD4 양성 T 세포에 제시하여, 항체 매개 면역 및 대식세포 활성화를 유도하는 T-헬퍼 이펙터 기능을 안내합니다.
  관련 참고문헌:
  PMID:15265931, PMID:15322540, PMID:17334368
• 종양 미세 환경에서 HLA-DR은 포식된 세포사 종양 세포 또는 거대 핀포시토시스(macropinocytosed)된 분비 종양 단백질에서 유래된 펩타이드를 제시하여, 암 면역 감시와 연결됩니다.
  관련 참고문헌:
  PMID:31495665
• HLA-DR은 또한 거대 자가포식(macroautophagy) 후 자가용해체(autolysosomes)에서 펩타이드를 제시하며, 이는 흉선 T 세포 선택 및 중앙 면역 관용에 필수적인 과정입니다.
  관련 참고문헌:
  PMID:17182262, PMID:23783831
• MHCII에 의한 면역 지배적 에피톱 선택은 병원체 유래 펩타이드에 대한 "먼저 결합, 나중에 절단/트리밍"과 자기 펩타이드에 대한 "먼저 절단, 나중에 결합"의 두 가지 뚜렷한 처리 경로를 따릅니다.
  관련 참고문헌:
  PMID:25413013
• 펩타이드 위치 1의 큰 소수성 앵커 잔기는 MHCII 결합 홈(binding groove)과의 고친화도 상호작용에 필수적입니다.
  관련 참고문헌:
  PMID:8145819
• 세포 내적으로 HLA-DR은 세포막에 존재하지만, 소포체 및 엔도솜/리소좀 구획(초기 및 후기 엔도솜, 리소좀, 자가용해체 포함)을 통해 이동합니다.
• 주로 전문 항원 제시 세포인 대식세포, 수지상세포, B 세포뿐만 아니라 T 세포 교육을 매개하는 흉선 상피세포에서 발현됩니다.
  관련 참고문헌:
  PMID:15322540, PMID:23783831, PMID:31495665
• 주요 구조적 특징으로는 시그널 펩타이드, 단일 트랜스맴브레인 나선, 이황화 결합, N-결합 글리코실화를 포함하며, 유비퀴틴화의 대상이기도 합니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 재조합 면역원은 인간 HLA-DRA의 아미노산 26–126을 포함하며 N-말단 세포외 도메인을 덮습니다. 이 영역은 베타 체인보다 다형성이 낮아 HLA-DR 대립유전자에 대한 광범위한 반응성을 제공할 수 있으나, 대상 세포 시스템에서의 검증이 권장됩니다.
• 웨스턴 블로팅의 경우, 환원 조건 하에서 약 29 kDa의 밴드가 예상됩니다. 양성 대조군으로 인간 APC 유래 세포주(예: Raji, 분화된 THP-1) 또는 높은 MHCII 발현 조직을 사용하는 것이 좋습니다.
• 면역형광법/ICC의 경우, 타겟이 막 국소화되어 있고 세포내 구획(엔도솜/리소좀)에서도 검출될 수 있으므로 고정 및 투과화 프로토콜을 최적화해야 합니다. 막 마커와의 이중 염색이 권장됩니다.
• ELISA의 경우, 이 항체는 가용성 HLA-DR 또는 펩타이드-MHC 복합체에 대한 포획 또는 검출 시약으로 적합할 수 있습니다. 선형성 및 특이성을 확립하기 위해 어세이 조건을 적정(titration)해야 합니다.
• 교차 반응성은 인간에 대해서만 보고되었으며, 다른 종과의 교차 반응성은 보장되지 않습니다. 비인간 영장류 샘플에 적용할 때는 서열 상동성을 확인해야 합니다.

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