WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA용 KO 검증 항-HMGB1 토끼 단클론 항체 - P09429

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: 고이동성 단백질 B1의 기능과 국소화

• HMGB1(고이동성 단백질 B1, HMG-1로도 알려짐)은 핵 내에서 DNA 샤페론으로 작용하는 다기능 산화환원 민감성 단백질로, 복제, 전사, 크로마틴 리모델링, V(D)J 재조합, DNA 복구 및 게놈 안정성에 관여합니다. (PubMed:33147444) 관련 참고문헌: PMID:33147444
• 세포 외로 방출될 때 위험 연관 분자 패턴(DAMP)으로 기능하며, RAGE, TLR2, TLR4와 같은 수용체에 결합하여 염증 및 면역 반응을 매개합니다. (PubMed:27362237, PubMed:34743181) 관련 참고문헌: PMID:27362237 PMID:34743181
• HMGB1의 활성은 산화환원 상태에 따라 결정됩니다: 완전 환원형은 케모카인으로, 이황화물 형태는 사이토카인으로 작용하며, 설포닐 형태는 면역 관용을 촉진합니다. (PubMed:23446148, PubMed:23519706, PubMed:23994764) 관련 참고문헌: PMID:23446148 PMID:23519706 PMID:23994764
• HMGB1의 세포하 국소화는 동적이며 핵, 염색체, 세포질, 세포막, 엔도좀, 소포체 및 분비 형태를 포함합니다.
• 아세틸화, ADP-리보실화, 인산화 및 산화와 같은 번역 후 변형이 HMGB1의 세포하 분포와 기능적 활성을 조절합니다.
• HMGB1은 널리 발현되며, 혈소판에서의 발현이 확인되었습니다. (PubMed:11154118) 관련 참고문헌: PMID:11154118
• 이 단백질은 숙주-바이러스 상호작용에 역할을 하며, SARS-CoV-2와 SARS-CoV의 진입에 필수적이고, 인플루엔자 A, EBV 및 뎅기바이러스의 복제를 촉진합니다. (PubMed:33147444, PubMed:35239449) 관련 참고문헌: PMID:33147444 PMID:35239449

실험 가이드 및 기술 팁

• 면역원은 인간 HMGB1의 100~200 아미노산에 해당하는 합성 펩티드입니다. 검출 특이성을 확인하기 위해 전장 재조합 단백질 또는 에피토프 매핑을 사용하는 것을 고려하세요.
• 웨스턴 블로팅의 경우, HMGB1의 예상 분자량은 약 25 kDa이며, 번역 후 변형 또는 산화환원 상태로 인해 여러 밴드가 나타날 수 있습니다.
• IHC-P에서는 항원 회수 방법을 최적화하고 알려진 HMGB1 발현 패턴을 가진 조직(예: 편도선, 간)을 사용해 검증하세요. 적절한 양성 및 음성 대조군을 포함하세요.
• IF/ICC에서는 세포 스트레스에 따라 HMGB1이 핵과 세포질 사이를 이동할 수 있음을 유의하세요. 전위를 평가하기 위해 LPS 또는 TNF-α와 같은 자극으로 세포를 처리하세요.
• ELISA의 경우, 선택한 검사 형식에 맞게 항체 쌍이 검증되었는지 확인하세요. 에피토프 영역(100~200)이 표적 항원 제제에서 접근 가능해야 합니다.

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