WB 및 ELISA용 Anti-HPRT1 토끼 단클론 항체 - P00492

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: HPRT1 기능 및 국소화

• Hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase (HPRT1)는 퓨린 회수 경로를 통해 hypoxanthine을 IMP로, guanine을 GMP로 전환하는 것을 촉매하여 퓨린 염기를 뉴클레오티드로 재활용합니다.
• HPRT1은 5-phosphoribosylpyrophosphate (PRPP)로부터 5-phosphoribosyl 그룹을 퓨린 염기로 전이하여, 핵산 합성과 세포 에너지학을 위한 퓨린 뉴클레오티드 생성에 중심적인 역할을 합니다.
• HPRT1은 종 간에 보존된 퓨린/피리미딘 phosphoribosyltransferase 계열의 구성원이며, X 염색체상의 HPRT1 유전자 (HGPRT)에 의해 인코딩됩니다.
• 세포 하위에서 HPRT1은 주로 세포질에 국소화되어 있으며, 그곳에서 회수 반응을 위한 기질에 접근합니다.
• 번역 후 변형에는 아세틸화, 인산화 및 isopeptide 결합 형성 (유비퀴틴화)이 포함되며, 이는 활성이나 안정성을 조절할 수 있습니다.
• HPRT1의 돌연변이는 심각한 신경 장애인 Lesch-Nyhan 증후군을 유발하며, 회수 결핍으로 인한 퓨린 과생산으로 통풍과 관련됩니다.
• 이 효소는 보조인자로 마그네슘을 필요로 하며 뉴클레오티드에 결합하여 phosphoribosyl 전이에서의 역할을 반영합니다.

실험 지침 및 기술 팁

• HPRT1의 중심 영역 (aa 119-218)에 기반한 면역원 설계는 N-말단 또는 C-말단 가변성을 피하면서 표적에 대한 특이성을 제공할 수 있습니다. 높은 서열 보존성으로 인해 관련 종 (인간, 마우스, 랫트)에서 테스트하는 것을 고려하세요.
• Western blot의 경우 예상 밴드는 약 25 kDa입니다. 적절한 분자량 마커를 사용하세요. knockout 검증이 필요한 경우 특이성을 확인하기 위해 HPRT1 KO 세포 용해물을 포함하세요.
• ELISA에서 펩타이드 또는 재조합 HPRT1 단백질로 표준 간접 분석을 사용할 수 있습니다. 코팅 조건 및 항체 희석의 최적화를 고려하세요.
• HPRT1이 편재하므로 샘플 유형에서 발현을 확인하세요. 일부 실험에서 loading control로 사용될 수 있습니다.
• 마우스 및 랫트 HPRT1과의 교차 반응성은 번역 연구를 가능하게 합니다. 원하는 모델 시스템에서 검증하세요.

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