유세포 분석용 항-인간 CD59 단일클론 항체 - P13987

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: CD59의 기능 및 위치

• protectin, MAC-inhibitory protein(MAC-IP), 20 kDa homologous restriction factor(HRF-20) 및 1F5 항원으로도 알려진 CD59는 보체 막 공격 복합체(MAC)의 중요한 억제제 역할을 하는 GPI 앵커형 세포 표면 당단백질입니다.
• 이 단백질은 조립 중인 MAC의 C8 구성 요소(C8A 및 C8B)에 결합하여 분자 간 베타 시트를 형성함으로써 다중 C9 분자의 통합을 방지하고, 이를 통해 삼투압 용해성 구멍의 형성을 차단하여 인간 세포를 보체 매개 용해로부터 보호합니다(PubMed:11882685, PubMed:1698710, PubMed:2475111, PubMed:36797260). 관련 참고 문헌: PMID:11882685, PMID:1698710, PMID:2475111, PMID:36797260
• 소변에서 발견되는 가용성 형태의 CD59는 보체 결합 활성을 유지하지만, 세포막에서 MAC 조립을 억제하는 능력은 크게 감소합니다.
• 이 단백질은 GPI 앵커를 통해 세포막에 위치하며, 분비된 형태도 검출되었습니다.
• CD59는 대체 접합(alternative splicing) 및 이황화 결합 형성, 당화, N-연결 당화를 포함한 번역 후 변형을 거치며, CD59의 돌연변이는 유전성 용혈성 빈혈과 관련이 있습니다.
• CD59의 예측 분자량은 14177 Da이며, 이는 SDS-PAGE에서 약 14–18 kDa으로 이동하는 관찰 결과와 일치합니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원은 인간 CD59의 세포외 도메인(aa 26–101)을 포함하며, 여기에는 MAC 결합을 위한 핵심 기능 부위가 포함되어 있습니다. 이 설계는 천연의 올바르게 접힌 구조를 인식하는 데 유리할 수 있습니다.
• 유세포 분석 시, 세포 표면의 GPI 앵커형 CD59를 보존하기 위해 살아있는 비고정 세포를 사용하는 것을 고려하십시오. 비특이적 결합을 최소화하기 위해 Fc 수용체 차단을 권장합니다.
• 최적의 희석 배수를 결정하기 위해 특정 실험 조건에서 항체를 적정하십시오. 형광단 안정성을 유지하기 위해 접합체를 빛으로부터 보호하고 반복적인 동결-해동 주기를 피하십시오.
• CD59 양성 세포(예: 백혈구)와 CD59 결핍 또는 녹아웃 대조군을 사용하여 특이성을 검증하십시오. 항-GPI 앵커 마커를 사용한 보완적 검출을 통해 막 위치를 확인할 수 있습니다.

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