WB, IF/ICC, ELISA용 항-IKKβ 토끼 pAb - O14920

주요 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: IKKβ 기능 및 세포 내 위치

• IKKβ는 표준 IKK 복합체의 핵심 촉매 서브유닛으로 작용하는 세린/트레오닌 단백질 키나아제로, 전염증성 사이토카인, 패턴인식수용체 및 유전독성 스트레스 하류에서 NF-κB 신호전달을 활성화하는 데 필수적입니다. 관련 참고문헌: PMID:9346484
• 보존된 세린 잔기에서 κB 억제제(IκB) 단백질을 인산화시켜 K48 연결 폴리유비퀴틴화 및 프로테아좀 분해를 유발합니다. 이 과정을 통해 NF-κB 이량체(예: p65/p50)가 유리되어 핵으로 전좌되고, 면역, 생존 및 염증 관련 유전자의 전사가 일어납니다. 관련 참고문헌: PMID:20434986, PMID:20797629, PMID:21138416
• IκB 기질 외에도 IKKβ는 NEMO/IKBKG, RELA, IKK 관련 키나아제인 TBK1 및 IKBKE를 포함한 여러 신호 전달 파트너를 인산화시켜 NF-κB 네트워크 내에서 피드포워드 활성화와 음성 조절 피드백을 모두 제공합니다. 관련 참고문헌: PMID:11297557, PMID:14673179, PMID:20410276
• 이 키나아제는 또한 비정규 기질인 FOXO3(TNF 유도성 세포사멸 촉진 전사인자의 불활성화를 매개함)와 STAT1(Thr-749에서 인산화되어 ARID5A 매개 IL-6 안정화 및 IL-12B 활성화를 촉진함)을 표적으로 하여 NF-κB를 세포사멸 및 선천성 면역 경로와 통합합니다. 관련 참고문헌: PMID:15084260, PMID:32209697, PMID:38621137
• 세포 분획 및 면역형광 연구에 따르면 IKKβ는 주로 세포질에 위치하며, 특정 자극에 따라 신호 의존적으로 핵으로 전좌되고 막 지질 뗏목으로 모집됩니다.
• 조직 발현 프로파일링에 따르면 심장, 태반, 골격근, 신장, 췌장, 비장, 흉선, 전립선, 고환 및 말초혈액에서 IKKβ가 높게 발현되는데, 이는 전신적인 염증 조절 역할과 일치합니다.
• 아세틸화, 하이드록실화, S-니트로실화 및 이소펩타이드(유비퀴틴 유사) 접합을 포함한 번역 후 변형은 IKKβ의 안정성, 활성 및 조절 파트너와의 상호작용을 미세 조정합니다.
• 임상적으로 IKBKB의 기능 상실 돌연변이는 중증 복합 면역결핍증(SCID) 및 기타 면역 조절 이상 증후군과 연관되어 있으며, 이는 면역 항상성에서 중복되지 않는 역할을 강조합니다.

실험 가이드 및 기술 팁

• 면역원은 인간 IKKβ의 C-말단 절반에 있는 400~669 잔기에 걸쳐 있습니다. 이 영역은 키나아제 도메인에서 원위부에 위치하며 웨스턴 블롯에서 관찰되는 보고된 29~87 kDa 범위와 일치하게 여러 스플라이스 변이체 또는 단백질 분해 절편을 검출할 수 있습니다. 전장 단백질을 보존하기 위해 샘플 제작 시 프로테아제 저해제 칵테일을 사용하는 것을 권장합니다.
• 웨스턴 블롯팅의 경우 관련 세포 시스템에서 siRNA 넉다운 또는 CRISPR-Cas9 녹아웃으로 특이성을 검증하고, 예측된 전장 분자량인 ~87 kDa와 비교하십시오. IF/ICC의 경우 세포질 및 유도성 핵 염색이 모두 예상되므로 핵 마커로 공동 염색하고 적절한 음성 대조군으로 확인하십시오.
• ELISA 적용의 경우 재조합 IKKβ 단백질 또는 펩타이드 면역원을 양성 포획 대조군으로 사용하고, 표준 간접 프로토콜을 사용하여 항체 적정량을 측정하여 신호 대 잡음비를 최적화하십시오.

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