WB, IF/ICC, ELISA용 IRAK1 다클론 항체 - P51617

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: IRAK1의 기능 및 위치

• IRAK1(interleukin-1 receptor-associated kinase 1)은 선천면역 반응의 개시에 필수적인 세린/트레오닌 키나제로, Toll 유사 수용체(TLR) 및 IL-1 수용체 신호전달 경로에서 핵심 매개체로 작용합니다.
• TLR/IL-1R이 활성화되면 IRAK1은 MYD88에 의해 신속하게 모집되고 IRAK4에 의해 인산화된 후 자가인산화를 거치며, 이 과정에서 하위 신호전달 사건이 촉발됩니다.
• IRAK1은 Pellino E3 유비퀴틴 리가제(PELI1, PELI2, PELI3)를 인산화하여 IRAK1 자체의 다중 유비퀴틴화를 촉진하고, 그 결과 IKK 복합체가 모집되어 NF-kB가 핵으로 이동합니다.
• 또한 TIRAP을 인산화하여 유비퀴틴화 및 분해를 촉진하고, IRF7을 직접 인산화하여 I형 인터페론 생성을 유도함으로써 항바이러스 상태를 확립합니다.
• 세포 내 위치는 세포질, 핵 및 지질 방울을 포함하며, IRAK1의 수모화(sumoylation)는 핵으로의 이동을 촉진하고, 핵에서 IRAK1은 STAT3을 인산화합니다.
• 주요 아이소폼은 두 가지가 존재합니다. 아이소폼 1이 아이소폼 2보다 더 강하게 발현되며, 두 아이소폼 모두 인간 조직에 편재적으로 존재합니다.
• IRAK1은 숙주-바이러스 상호작용에 관여하며 인산화, 유비퀴틴화 및 수모화를 포함한 다양한 번역 후 변형을 겪습니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원은 인간 IRAK1의 아미노산 424-633에 해당하며, 인간, 마우스 및 랫드에서 보존된 영역이므로 관찰된 교차 반응성을 뒷받침합니다.
• 웨스턴 블롯의 경우 TLR/IL-1R로 자극한 면역세포(예: THP-1, RAW264.7)의 전체 세포 용해물을 사용하여 약 77 kDa 부근의 활성화 의존적 밴드를 검출하는 것을 고려하십시오. 기저 발현 수준은 다를 수 있습니다.
• IF/ICC 실험에서는 고정 및 투과화 조건을 최적화하십시오. 내인성 IRAK1은 세포 유형과 자극 조건에 따라 세포질과 핵 모두에 위치할 수 있습니다.
• ELISA에서는 일치하는 검출 항체(예: 다른 에피토프를 표적으로 하는 항체)와 조합하면 감도가 향상될 수 있습니다. 관련 시료 매트릭스에서 검증하십시오.
• 다클론 항체는 로트 간 변동성이 발생할 수 있으므로 각 분석에 양성 대조군(예: 자극한 세포)과 음성 대조군을 포함하십시오.

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