WB, IF/ICC, FC, ELISA용 Anti-KIR2DL2/KIR2DL3 단일클론 항체 - P43628

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: KIR2DL2/KIR2DL3 기능 및 위치

• KIR2DL3 (Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DL3, CD158b, p58 NK 수용체, NKAT2로도 알려짐)은 KIR 패밀리의 I형 막관통 당단백질 구성원입니다. 이는 HLA-Cw1, Cw3, Cw7을 포함한 특정 HLA-C 알로타입에 대한 천연살해세포(NK 세포)의 억제 수용체로 기능합니다.
• 이 수용체는 두 개의 세포외 면역글로불린 유사 C2형 도메인, 하나의 막관통 나선, 그리고 인산가수분해효소를 불러와 활성화 신호를 차단하는 면역수용체 티로신 기반 억제 모티프(ITIM)를 가진 세포질 꼬리를 포함합니다.
• KIR2DL3 발현은 주로 NK 세포로 제한되며, 여기서 자가 내성을 매개하고 표적 세포의 MHC class I 발현을 모니터링하여 'missing-self'를 순찰합니다.
• 리간드에 의한 KIR2DL3의 결합은 NK 세포 매개 세포독성을 억제하여 건강한 세포의 용해를 방지하는 동시에 HLA-C 발현을 감소시킨 세포의 살상은 허용합니다.
• 세포외 도메인은 N-연결 글리코실화 및 이황화 결합 형성을 거쳐 관찰된 다중 분자량 형태(~27 kDa 비글리코실화 및 ~37–38 kDa 글리코실화 형태)에 기여합니다.
• 별개의 유전자에 의해 암호화되는 KIR2DL2는 KIR2DL3와 약 96%의 아미노산 상동성을 공유하며 유사한 HLA‑C 특이성을 나타냅니다; 항체의 면역원(KIR2DL3의 aa 22‑245)은 두 수용체 간에 보존된 영역에 걸쳐 있어 교차 검출을 가능하게 합니다.
• KIR2DL3 전사체의 선택적 스플라이싱은 리간드 결합 또는 신호 전달 특성이 변경된 변이체를 생성할 수 있지만, 전체 길이 이소형이 주요 기능 형태입니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 웨스턴 블롯의 경우, 약 27 kDa(비글리코실화) 및 37–38 kDa(글리코실화 형태) 근처의 밴드를 예상하십시오. 환원 조건을 사용하고 양성 대조군으로 KIR 양성 NK 세포주(예: NK92, YTS)의 총 세포 용해물을 로딩하십시오. 밴드 패턴을 단순화하기 위해 PNGase F를 사용한 탈당화를 고려하십시오.
• 면역원이 세포외 도메인을 포함하므로, 이 항체는 천연 표면 수용체를 인식합니다; 유세포 분석 및 면역형광의 경우, 표면 염색을 위해 투과화 처리는 필요하지 않습니다. 인간 PBMC 또는 분리된 NK 세포에서 특이성을 보장하기 위해 항체를 적정하고 동형 대조군을 포함하십시오.
• ELISA 적용의 경우, 이 단일클론 항체는 포획 또는 검출 시약으로 사용될 수 있습니다; 샌드위치 면역분석법을 구축하는 경우, 별개의 에피토프에 대한 결합체와 짝을 이루십시오. 재조합 KIR2DL3 단백질 또는 세포 용해물로 검증하십시오.
• 높은 서열 상동성을 고려하여, 각 수용체를 개별적으로 발현하는 세포주(예: 293T 형질주입 세포)에서 테스트하여 KIR2DL2에 대한 교차 반응성을 확인하십시오.
• KIR 다형성으로 인해, 염색 패턴은 기증자 간에 다를 수 있습니다; 각 적용 분야 및 세포 유형에 대해 항체 농도를 최적화하십시오.

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